酶学技术二课稿.ppt

4. 临床意义 CK及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶之一，主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断。 (1) AMI的早期诊断 总CK在AMI诊断中意义不大 CK-MB为诊断AMI的金指标 CK-MM3/CK-MM11.0为诊断AMI的标准（排除急性骨骼肌损伤） CK-MB21.9U/L或CK-MB2/CK-MB11.5为诊断AMI的标准之一 (2) 全身疾病特别是肌肉疾病时，CK极度升高 P169 * 四、乳酸脱氢酶及其同工酶和亚型 乳酸脱氢酶 （lactate dehydrogenase，LD/LDH） 1. 催化反应 LD催化乳酸氧化成丙酮酸，同时将氢转移给辅酶而成为NADH，依条件不同而有可逆性。 L-乳酸＋NAD+ 丙酮酸＋NADH＋H+ pH8.8～9.8 Ph7.4～7.8 P169 * 2. 组织分布 LD是一种含锌的糖酵解酶，广泛存在于人体各组织中，以肝、心肌、肾、肌肉、RBC含量最高。 LD是由两种不同亚基（M和H）组成的四聚体，形成5种结构不同的同工酶，即LD1(H4)，LD2(H3M)，LD3(H2M2)，LD4(HM3)和LD5(M4)。 1.以LD1为主，主要在心肌，可占总LD活性50％以上，也存在于RBC内； 2.以LD5为主，以横纹肌为代表，肝脏中也有； 3.以LD3为主，存在于脾肺。 一般成年人血中LD同工酶存在如下规律：LD2LD1LD3LD4LD5，部分正常儿童血中可见LD1LD2。 * 3. 标本 一般用血清，用血浆需离心去除血小板（血小板中含有大量的LD），采血后迅速分离血清；因RBC中LD含量比血清高100倍以上，不宜用溶血标本。 LD4、LD5宜冷变性，不应放在冰箱中，25 ℃放2-3d，LD活性变化不大。 * “血清酶”是指存在于血清中的酶，而非血清特定产生的。 * 血浆特异酶 血浆特异酶 血浆特异酶 血浆蛋白的固有成分，在血浆中发挥催化作用； 以酶原形式分泌入血； 肝脏中合成； 血中含量以mg％表示； * 血清酶甚至同工酶之间半寿期差别很大。这些有助于了解同一疾病不同酶升高持续时间的差异，半寿期长的酶，在血清中持续时间长。 * 第五章  酶学分析技术 P136-176 第一节 血 清 酶 * 一、血清酶的来源 根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况，将其分为： P143 一般代谢酶 组织专一酶 血浆特异酶 非血浆特异酶 外分泌酶 细胞酶 一般代谢酶 组织专一酶 血浆特异酶 非血浆特异酶 外分泌酶 细胞酶 血 清 酶 * 名称 血浆特异酶 非血浆特异酶 外分泌酶 细胞酶 一般代谢酶 组织专一酶 来源 肝 消化腺或其它外分泌腺 各组织器官 （无器官专一性） 肝 （有器官专一性） 种类 凝血酶原、Ⅹ因子、Ⅻ因子、纤溶酶原、ChE、CER、LCAT、脂蛋白脂肪酶等 胰淀粉酶、胰脂肪酶、胰蛋白酶、ACP、ALP等 LDH、AST、ALT、CK、MDH等 OCT等 * 二、血清酶的去路 酶蛋白在血管内的失活与降解（主要代谢去路） 血清酶的半寿期（T1/2)： 酶失活至原来活性一半所需时间。 有助于了解同一疾病不同酶升高持续时间的差异。 只有血清酶的来源与去路保持平衡，才能维持酶活性保持相对恒定。但一些病理情况（合成异常，释放增加，排出异常）往往促使这种平衡被打破，导致血清酶活性的变化。 P143 * 三、血清酶变化的病理机制 （一）合成异常 合成减少 合成增多 肝损害导致合成酶的能力受损 （ChE、LCAT） 酶基因变异引起酶合成减少 （铜氧化酶） 增生性疾病（骨骼疾病，ALP) 恶性肿瘤（前列腺癌，ACP) 酶的诱导作用（乙醇，γ-GT） P144 * （二）释放增加（大多数血清酶增高的主要机制） 细胞内外酶浓度的差异 对于非血浆特异酶，细胞内外浓度差可在千倍以上，只要有少量细胞坏死或病变，血中酶浓度明显升高。对血浆特异酶，细胞病变很少引起血中酶浓度明显升高。 线粒体酶不易从细胞中释出，如ASTm的检测往往反映肝细胞的损伤程度，且是AMI中最后升高的酶，用于判断预后；有些