第十章色谱技术解析.pptVIP

一、色谱法分类 二、基本概念 （一）概述 液相色谱主要通过目标组分或待分离物在两相间分配能力或作用力不同而使目标组分得以分离，其中一相保持不动，称为固定相，而另一相移动，被称为流动相。待分离组分，通过在固定相以及流动相之间各种作用力的矢量和差异而得到分离，这些作用有色散力、氢键、离子键、亲水作用、疏水作用、静电相互作用、分子扩散、亲和、络合、共价键修饰或交换等。 （二）固定相 也称为柱填料，是液相色谱的核心部件。固定相的骨架材料又称为色谱基质利用化学或其他方法将相应特性的分子键合至色谱基质表面，构成键合固定相，也称为键合相色谱填料。 1.色谱基质 2.粒径和结构 4.键合相：是共价键合或通过吸附、涂敷等附着于色谱基质表面上的提供与流动相中溶质分子产生相互作用的分子。 保留因子或容量因子：k?=(tR-to)/to=(VR-Vo)/Vo k?越大，则表明该溶质在特定条件下与固定相的作用力越强，对应于保留时间来说，其保留时间较长；反之，则保留时间较短。 选择因子：?=kB?/kA? 选择因子?越大，则表明A和B两种成分于特定条件下在该柱子上越容易被分离开来。 柱效：N=16(tR/W)2=5.54(tR/Wh/2)2 柱子效率越高表明特定条件下固定相对某溶质的分离效果越好。 分辨率：Rs=(tRB-tRA)/(WA+WB)1/2 =(tRB-tRA)( WAh/2+WBh/2)0.85 =(1/4)(?-1)(N1/2)(k?/1+k?) Rs 值越大，两种组分分离的越好。 Rs = 1，两组分具有较好的分离，互相沾染约2%，即每种组分的纯度约为98%。当Rs=1.5时，两组分基本完全分开，每种组分的纯度可达到99.8%。 （二）柱效 柱效：N=16(tR/W)2=5.54(tR/Wh/2)2 依据塔板理论，塔板数越高，表明溶质分子在柱子上的分离效率越高。N已知，柱效可通过柱子的长度（L）与理论塔板高度（H）之间的比值进行计算，即N=L/H。 小粒径色谱填料、低流动相流速和不太粘稠的流动相有利于减小H值。H值小，则N大，此时W也小。 （三）样品负载量 样品负载量也称柱容量，是指可以注入色谱系统而又不会使柱过载的最大可进样品量，通常以每克柱填料对应的的最大进样量来表示。 它显示了柱的大小和其对应的样品处理能力，对于分析性色谱来说，样品负载量决定了动态的分析范围。 两种计算方法： （1）以非装柱的形式，通过样品与对应数量的柱填料之间的平衡，确定最大样品负载量； （2）以装柱的形式，在柱色谱中，当进样量达到柱子的饱和负载量时，洗脱液中样品的浓度等于注入样品的浓度。 第二节 吸附色谱 吸附是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程，被吸附的物质称为吸附质。 四个步骤： （1）吸附剂通入待分离的料液（或气体）； （2）吸附质被吸附到吸附剂表面 （3）料液流出 （4）吸附质解吸回收，吸附剂再生。 一、吸附类型 （一）物理吸附——分子间引力（范德华力） 特点： （1）无选择性 （2）吸附量可由物系不同 相差较大 （3）低温可进行 （4）单、多分子层吸附均可 （5）易达到吸附平衡状态 一、吸附类型 （二）化学吸附——化学键 特点：（1）较高温进行 （2）放热 （3）单分子吸附 （4）不易和解析，平衡慢 （5）选择性强 一、吸附类型 （三）交换吸附——双电层 特点：（1）吸附剂和溶液发生离子交换 （2）吸附力决定于离子所带电荷 二、常用吸附剂 吸附剂具备特性： （1）对被分离的物质具有很强的吸附能力，即平衡吸附量大； （2）有较高的吸附选择性； （3）有一定的机械强度，再生容易； （4）性能稳定、价廉易得。 （一）、活性炭 活性炭按照粒径大小可分为粉末活性炭、颗粒活性炭以及基于粉末活性炭制备的颗粒型活性炭。 （二）、大孔网状聚合物吸附剂 性质与活性炭、硅胶相似，简称大网格吸附剂、大孔树脂吸附剂或吸附树脂。 （1）脱色去臭力与活性炭相当，对有机物质具有良好的选择性 （2）性质稳定，机械强度好，经久耐用，品种多 （3）吸附速度快，易解吸，易再生，直径在0.2~0.8mm之间，不污染环境，使用方便 （4）价格昂贵，吸附效果 易受流速和溶质浓度等因 素影响 1. 大孔网状聚合物吸附剂类型和结构 2.