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【优化方案】2014届高考生物一轮复习 专题5、6 DNA和蛋白质技术 植物有效成分的提取课件 新人教版选修1
5 橘皮精油主要贮藏在橘皮部分,提取时一般不采用图乙所示的方法,原因是_________________________________________________。 为了防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率,需要将柑橘皮干燥去水,然后用________浸泡,使橘皮变得粗糙,细胞变得疏松,防止橘皮压榨时滑脱。 答案: 1 水蒸气蒸馏法 花开的盛期 2 分离油层 NaCl 无水Na2SO4 一定的水分 3 撤出酒精灯 供水 4 不 易 5 橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏时会发生部分水解 石灰水 [易错警示] 对DNA粗提取与血红蛋白提取易于混淆 2013·江苏南京模拟 下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中,错误的是 A.可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到DNA和蛋白质 B.用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可除去部分杂质 C.透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜 D.进一步分离与纯化血红蛋白时可用凝胶色谱法、离心法和电泳法等 例1 【解析】 猪是哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体,不能从其红细胞中提取出DNA。 【答案】 A 【纠错笔记】 提取物质 DNA 血红蛋白 提取方法 盐析法 凝胶色谱法、电泳法 提取原理 ①DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 ②DNA不溶于酒精,但某些蛋白质则溶于酒精 ①根据相对分子质量的大小 ②各种分子带电性质的差异 步骤 ①溶解在2 mol/L的NaCl溶液中 ②加水稀释至0.14 mol/L NaCl溶液使DNA析出过滤 ③加入冷却酒精析出 ①样品处理 ②粗提取 ③纯化 ④纯度鉴定 没有注意纸层析操作的注意事项 图中为胡萝卜素的纸层析结果示意图,属于标准样品的层析点的是 A.①② B.③④ C.⑤⑥ D.③④⑤⑥ 【解析】 标准样品中的色素种类单一,在滤纸上扩散的速度相同,因此只出现一个色素圆点。 【答案】 B 例2 【纠错笔记】 1 层析时注意选择干净的滤纸,为了防止操作时对滤纸的污染,应尽量避免用手直接接触滤纸,可以戴手套进行操作。 2 点样时应注意点样斑点不能太大 直径应小于0.5 cm ,如果用吹风机吹干,温度不宜过高,否则斑点会变黄。 3 将点好样的滤纸卷成筒状,卷纸时注意滤纸两边不能相互接触,以免因毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快,溶剂前沿不齐,影响结果。 4 层析液不可没及样品原点,以免色素溶解于层析液中,使鉴定失败。 5 层析是否提取到胡萝卜素,通过与标准样品中的β-胡萝卜素作对比予以确认。 目录 专题5、6 DNA和蛋白质技术 植物有效成分的提取 本节目录 回归教材?夯实基础 知能演练?强化闯关 高频考点?深度剖析 回归教材?夯实基础 基础盘点 蒸馏水 物理和化学 DNA含量 滤液 3 杂质的去除方案 ①利用DNA在不同浓度的_______ 溶液中溶解度的不同,通过控制其溶液的浓度去除杂质。 ②用木瓜蛋白酶去除_______。 ③用高温 60~75 ℃ 使_______变性。 4 DNA的析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、 _____________溶液可使DNA析出。 5 DNA的鉴定:将析出的DNA溶于物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中,加入二苯胺试剂,沸水浴加热,溶 液变蓝。 NaCl 蛋白质 蛋白质 冷却的酒精 二、多聚酶链式反应扩增DNA片段 1.PCR原理 在80~100 ℃的温度范围内,DNA发生_______,双螺旋结构解体,在温度缓慢降低后,DNA发生_______,DNA单链与 _______通过碱基互补配对结合,耐高温的DNA聚合酶从____________开始延伸DNA链。 2.PCR的条件 缓冲溶液、DNA模板、2种_______、4种脱氧核苷酸、耐 热的DNA聚合酶,同时要控制温度。 变性 复性 引物 引物的3′端 引物 三、血红蛋白的提取和分离实验 1.常用的分离方法: ___________法、凝胶电泳法等。 2.基本原理 1 凝胶色谱法的原理:相对分子质量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙,路程____,流动____;相对分子质量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部,路程____,流动____。 2 凝胶电泳法的原理:不同蛋白质的带电性质、 ______、形状和______不同,在电场中受到的作用力大小、 ______、阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动_______和运动______不同。 凝胶色谱 短 快 长 慢 电量 大小 方向 方向 速度 3.血红蛋白的提取和分离程序 1 样品处理 红细胞的洗涤→___________的释放→分离血红蛋白溶液。 2 粗分离——_______:除去样品中相对分子质量较____ 的杂质。 3 纯
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