【优化方案】2015年高考生物总复习 第十单元 专题2 微生物的培养与应用配套课件.ppt

③培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。 ④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。 ⑤改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。 2．微生物的计数 1 显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板直接计数。 ③缺点：一般不能区分死菌与活菌。 2 间接计数法 活菌计数法 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②计算公式：每克样品中的菌株数＝ C÷V ×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积 mL ，M代表稀释倍数。 ③操作：设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 3 设置对照 ①目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 ②方法： 对照组 作用 现象 结论 未接种培养基 有无杂菌污染的判断 未接种的培养皿中无菌落生长 未被杂菌污染 接种的牛肉膏蛋白胨培养基 选择培养基筛选作用的确认 牛肉膏培养基上的菌落数大于选择培养基上的数目 选择培养基具有筛选作用 [提醒]　 1 为了使结果接近真实值，应设置3个或者3个以上的平板，计算平均菌落数。 2 计算时，明显偏离本组其他平板菌落数的要舍弃后再求平均值。 3 由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。 4 即使使用了选择培养基，所得到的微生物也未必全为“目标微生物”,因此,常需对选择培养基中菌落做进一步鉴定。 3．分解尿素的细菌的分离 1 由于NH3的产生，培养基碱性增强，pH升高，因此可通过检测pH的变化来判断该化学反应是否发生。 2 方法：以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则pH升高，说明该种细菌能分解尿素。 富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。如图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。 1 本实验所需培养基为______________，碳源为 ____________________。 2 实验原理是 _______________________________________________________________________________________________________。 3 ①→③重复培养的目的是 ___________________________________________________。 4 ⑤的菌落中大部分是降解______________的微生物。 对羟基苯甲酸 选择培养基 对羟基苯甲酸 利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，选择出能降解对羟基苯甲酸的微生物 增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例 5 ⑥为________组，⑦为________组，设置⑥的目的是 ___________________________________________________。 6 ⑤→⑥采用____________法，接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是 __________________________________________________________________________________________________________ ___________________________________________________。 [解析]富集培养的培养基是一种选择培养基，可用于具有某种代谢特点的微生物，本题就是为了选择出能分解对羟基苯甲酸的微生物。该实验的培养基的碳源为对羟基苯甲酸；全过程包括筛选→扩大培养→纯化→鉴定。 接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌种接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物