不同持续时间离心运动对大鼠骨骼肌LDH和SDH的影响.docVIP

不同持续时间离心运动对大鼠骨骼肌LDH和SDH的影响 　　【摘 要】目的：探讨离心运动对发育期大鼠骨骼肌有氧代谢和糖酵解能力的影响。方法：将发育期与成年大鼠随机分为对照组（NC组）、3W训练组（T3组）、6W训练组（T6组）、9W训练组（T9组），参照Bedford的运动负荷方案。采用紫外分光光度法测定SDH活性，采用半自动生化分析仪测定中LDH活性。结果发现离心运动可引起发育期大鼠SDH先升高后降低，LDH先降低后升高。离心运动对发育期大鼠SDH、LDH的影响大于成年大鼠，且在运动6W时差异最大。 　　【关键词】离心运动；发育期大鼠；LDH；SDH 　　0 前言 　　琥珀酸脱氢酶（SDH）为线粒体的标志酶，可催化琥珀酸生成延胡索酸即参与TCA循环，可用于评定运动员有氧氧化能力的高低。乳酸脱氢酶（LDH）分布于肾脏、骨骼肌、肝脏和心脏等器官，其活性大小可用来评价运动员无氧代谢能力的高低。耐力性运动员肌纤维中有氧代谢酶（SDH）活性高，而无氧代谢酶（LDH）活性低，速度性运动员则相反[1]。 　　王松[2]等研究发现有氧耐力训练对骨骼肌的影响与年龄有关，提示早期（幼儿时期）进行有氧耐力训练可能是提高有氧运动能力的最佳时期。本文通过观察3周、6周和9周离心运动训练对发育期大鼠股四头肌LDH及SDH活性的变化，探讨离心运动训练对发育期大鼠骨骼肌的影响及其时间适应性变化。 　　1 材料与方法 　　1.1 动物与分组 　　健康SD雄性大鼠48只（分8组，每组6只；发育期24只，3周龄；成年大鼠24只，3月龄），常规饲养。将发育期与成年大鼠随机分为对照组（NC组）、3W训练组（T3组）、6W训练组（T6组）、9W训练组（T9组）。以国家标准啮齿类动物饲养，实验期间室温保持22℃±2℃相对湿度为50%±5%，自然光照，自由饮水，分笼饲养，坚持1-2d换一次垫料。 　　1.2 运动方案 　　采用杭州立泰科技有限公司PT动物实验跑台，参照Bedford[3]的运动负荷方案。第一周为熟悉跑台和适应运动负荷阶段，运动强度逐渐增加（跑台坡度由0°-10°，跑台速度由10m/min逐渐增加到26.8m/min，训练时间逐渐增加），从第二周开始进行正式训练，每次训练保持跑台坡度为10°不变，跑台速度在训练开始后1分钟左右升到26.8m/min，运动时间为30min。每周训练5天，休息2天。运动时采用毛刷刺激大鼠尾部，必要时采用声音刺激或电刺激，以保证运动强度与运动量。 　　1.3 检测指标与方法 　　取待测样品，稍解冻后，剪取股四头肌肌腹红白混合处组织约0.5g，称重，用生理盐水按1：10稀释后匀浆，以1000～2000r/min离心20分钟（美国Sigma2K-15型低温离心机） ，吸取上清液待测。以上步骤均在0～4℃条件下进行。 　　股四头肌SDH活性：采用紫外分光光度法（美国Beckman DU- 640）测定10%腓肠肌匀浆液中SDH活性。SDH试剂盒购于北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司。 　　腓肠肌LDH活性：采用半自动生化分析仪（Rayto公司，德国）内设的“速率法”测定0.5%腓肠肌匀浆液中LDH活性。 　　总蛋白浓度：双缩脲法。采用半自动生化分析仪（Rayto公司，德国）内设的“终点法”测定。总蛋白试剂盒由北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司提供。 　　1.4 统计方法 　　所有数据均采用SPSS13.0统计软件处理，结果用平均数、标准差（■±S）表示。两组样本平均差异的显著性检验（双侧t检验），显著水平取α=0.05。 　　2 结果 　　2.1 各组大鼠股四头肌SDH的变化 　　表1 大鼠股四头肌SDH的变化情况（U/mgpro） 　　注：*表示与NC组比较p0.05，▲表示T3与T6比较p0.05，★表示T6与T9比较p0.05，●表示T3与T9比较p0.05，?表示MT与DT比较p0.05，下同. 　　图1 　　实验结果如表1所示：与NC组相比，发育组大鼠3W与6W组比较SDH升高（p0.05）；与成年组相比，3W与6W组SDH高于DT组（p0.05）。发育组与成年组比较3周与6周组SDH活性有明显提高，9周组无明显差异。 　　训练时间对SDH的影响如图1所示，从时间上比较，DT组3W组SDH活性明显高于6W、9W组（p0.05），而6W组又明显高于9W组。MT组3W、6W组SDH活性与NC组相比呈下降趋势但无统计学意义，9W组SDH升高但亦无统计学意义。DT组随着训练时间的延长，其SDH酶活性曲线先上升后下降，在3周时达到最高峰。MT组先下降后上升，在9周时达到最高。 　　2.2 各组大鼠股四头肌LDH的变化 　　表2 大鼠股四头肌LDH的变化情况（U/100mgpro）