废物焚烧炉排气、飞灰和炉灰中的二口恶英类的简易监检.docVIP

废物焚烧炉排气、飞灰和炉灰中的二口恶英类的简易监检法 全 浩 （中国环境科学学会防治二口恶英专家委员会） 摘 要 本文叙述了以现代分子生物学的最新研究成果为基础迅速发展起来的生物检测技术的兴起和发展并介绍了目前在废物焚烧炉的烟道气、飞灰和炉灰中二恶英类检测中开始得到应用的几种生物检测的原理，检出下限和定量下限以及操作时的应注意事件等。 关键词 二恶英 生物检测法（BioA） Ah受体 DNA探针 PCR技术 自上个世纪90年代至今，美国、日本和欧盟等国以现代分子生物学的研究成果为基础，研究开发了生物检测法（Bioassay，以下简称为BioA）BioA列为今后重要发展领域说明了这一点。另一方面，世界各国面对自去年开始在全球范围内实施的以控制和削减持久性有机污染物（POPS）为主要内容的斯德哥尔摩公约（简称为POPS 公约），为了控制和削减POPS 而对二恶英类（dioxins，DXN）、残留农药和环境荷尔蒙等进行测定的BioA法应运而生，并显示了其快速、灵敏、特异性强、操作简便，不需要昂贵仪器设备，成本低的优点，受到各国的极大关注。例如，日本环境省业已确定了要积极推动BioA法的开发和研究，并逐步实现BioA 法向国家标准监测方法（以下简称为国标法）过渡的方针。由于利用BioA 法测定DXN与目前各国采用的高分辨GC/MS（以下简称为HR?GC/HR?MS）相比，其成本可以降低60%-80%，分析所需要的时间由10-20天缩短到2-3天，操作简便，因而通常人们称它为简易测定法，目前这一技术受到发达国家和发展中国家的普遍重视。本文以废物焚烧炉的烟气、飞灰和炉灰中DXN测定为例扼要介绍DXN简易测定法，为我国实施POPS 公约和环境污染监测创造条件。 一、国外DXN简易测定法的进展 为了说明近几年来国外DXN简易测定法的研究和实用情况，在表1中列举了国外采用DXN简易测定法的进展情况。 二、生物检测法的几种类型及其原理 （一）BioA法的分类 目前，简易测定法包括色谱/低分辨质谱（GC/LRMS）和BioA两种方法。本文重点介绍BioA法。所谓BioA法是指利用当某种特定物质如DXN与小型生物，细胞或者生物组成物质反应时的特异性响应或应答来测定某种特定物质的活性或量的方法。因而它是一种分子水平的快速，超微量检测技术。近几年来，BioA法已在农业、食品、医疗、环境等领域得到广泛应用。其中，目前国内外用来测定DXN的几种方法的分类（见图1）及其原理分述如下。 （二）几种BioA法的原理 1.通讯基因检测法的原理 经过多年来的研究，研究人员基本弄清了DXN在生物体内产生毒性的机理。当DXN与细胞接触时，DXN首先与细胞内的Ah受体相结合，然后转移到细胞核内。Ah受体与DXN结合之后 表1 国外关于DXN简易测定法（BioA）的沿革年表 1999年 1999年5月，在比利时发生鸡肉DXN污染事件中，BioA法被用来对鸡、鸡肉、鸡蛋以及这些为原料的几十种产品中被怀疑的样品进行了二口恶英污染筛选检测。 2000年 比利时国立公共卫生科学研究所（SIPH）采用BioA法对可能被DXN污染的几十种食品、饲料和生物体样品进行了检测。 美国环保局（US EPA）于2000年11月制定了EPA Method 4425，即BioA法（通讯基因检测法）用于测定土壤、底泥、生物组织和水。 2001年 美国食品和药品管理局（FDA）决定采用BioA法检测食品中的DXN。 2002年 欧盟（EU）为了从2002年7月1日开始实施的《食品、饲料的二口恶英类标准》，于2002年7月26日颁布的EC指令（2002/69/EC）中规定，把BioA法作为筛选方法来使用。这里的筛选方法是指利用细胞的BioA（Cell-based bioassay）和利用试剂盒的BioA（Kit-based bioassay）两种。 美国环保局于2002年10月制定了EPA Method 4025，即用抗DXN抗体的免疫检测法来检测土壤中的DXN。 2003年 日本环境省于2003年5月成立了《DXN简易测定法探讨会》，以BioA为中心开始对DXN简易测定法进行了验证和技术评价。 2004年 2004年5月，日本环境省DXN简易测定法探讨会公布了关于简易测定法的技术评价报告，并明确指出用简易测定法对废物焚烧炉排放的烟气（焚烧能力小于2t/h的炉体）、飞灰和炉灰（以下简称为焚烧三物质）进行测定是适宜的。与此同时，环境省明确了国家不仅要推进简易测定法的技术开发，而且要促进其成果的采用和普及的方针。 日本国土交通省于2004年7月首次公布了“河流、湖泊底泥中的DXN简易测定法（草案）”，从而第一次把简易测定法（GC/LRMS）和BioA两种方法定为部级标准