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细胞电生理研究进展 一 电压钳（voltage clamp）技术 （一）电压钳 基本原理 离子通道电流: 细胞膜上的电流 膜电容充放电电流 电压钳技术－－消除膜电容电流的影响 电压钳技术的基本原理：用微电极将膜电压钳制到新的数值上，保持一段时间不变使膜电容完成充放电过程进入电压钳制的稳态期， 测得的跨膜电流可以认为来自于离子通道电流。 （二）理想的电压钳 （三）双电极电压钳 加记录电极实现闭环电路的反馈控制 （四）单电极电压钳 在电压钳制的稳态期，钳制电压VC Vm × Rm ＋RCE /Rm 只有当钳制电极的电阻RCE远小于细胞膜电阻Rm时，Vm≈VC 二、膜片钳实验技术 膜片钳技术是细胞生物学研究的一个重大发明。 （一）膜片钳技术发展历史 1976年德国马普生物物理化学研究所Neher和Sakmann首次在青蛙肌细胞上用双电极钳制膜电位的同时，记录到ACh激活的单通道离子电流，从而产生了膜片钳技术。???1980年Sigworth等在记录电极内施加5-50 cmH2O的负压吸引，得到10-100GΩ的高阻封接（Giga-seal），大大降低了记录时的噪声实现了单根电极既钳制膜片电位又记录单通道电流的突破。 1981年Hamill和Neher等对该技术进行了改进，引进了膜片游离技术和全细胞记录技术，从而使该技术更趋完善，具有1pA的电流灵敏度