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加工过程中皮革组织结构的显示 摘要：分别用三色染-苏丹Ⅳ染色法和醛品红染色法制备山羊原料皮、浸酸皮、浸灰碱皮、软化皮的组织切片，通过显微镜观察分析不同处理阶段对皮革组织结构的影响。 关键词：组织切片，弹性纤维 前言 组织切片技术就是将生物组织切成很薄的切片即5~25 μm 光学显微镜观察）、50~70 nm（透射电镜观察），再根据不同成分与染料亲和力不同，对切片进行染色，以显示不同细胞与组织的形态，然后在显微镜放大数十倍到数十万倍进行观察。组织切片技术是皮革工业中一种重要的研究和生产控制手段[1]，通过组织切片能比较直观地观察皮革的组织结构情况。在皮革行业中，利用显微技术观察皮板的表皮、乳头层、网状层，以及真皮内的毛囊、汗腺、脂腺、肌肉组织等的形貌和分布状态，胶原纤维束以及胶原纤维、弹性纤维等的形态、编织方式。因此，通过对生皮组织结构状态、生皮在制革加工过程中的组织结构变化的研究，可为制革生产厂家制订和修订工艺方案提供参考依据。本文采用组织切片技术，观察山羊原料皮、浸灰皮、软化皮和浸酸皮的组织结构，初步研究了不同处理阶段对山羊皮组织结构的影响，并介绍了皮板组织结构的变化。为正确进行皮革鞣前处理提供了一定的理论依据。 实验部分 分别采用三色- 苏丹Ⅳ染色法和醛品红染色法，以光学显微镜为主要观察手段，透射观察不同试样切片的组织结构，尤其是胶原纤维、弹性纤维和脂肪成分，以比较不同工序皮板组织结构的变化情况[2] 试剂 酸性复红，酸性染料，主要用于表皮着色和套染；苯胺蓝，酸性染料，主要用于胶原纤维及其他结缔组织的染色；橘黄G，酸性染料，主要用于套染；苏丹Ⅳ，不是一种染料，溶解在脂肪中使脂肪显色；磷钼酸，杂多酸，用作酸性助剂； 实验仪器 全自动冰冻切片机，英国；MDI 多媒体显微镜，上海复生科技实业有限公司。 试验方法与过程 从固定液中取出明胶块，修正，用水冲洗一下，置于冰冻切片机上冰冻，切片。采用三色染- 苏丹Ⅳ染色法和醛品红染色法分别染色。之后采用光学多媒体显微镜下观察。三色染- 苏丹Ⅳ染色法：切片水洗→酸性复红0.5 min→橘黄G 0.5 min→磷钼酸1 min→苯胺蓝2min→蒸馏水洗→30%酒精速洗→50%酒精速洗→70%酒精1min→苏丹Ⅳ0.5~1.0 min→50%酒精速洗→30%酒精速洗→水洗→阿拉伯胶封固。 醛品红染色法：切片水洗→0.5%高锰酸钾水溶液1~2 min→蒸馏水洗→1%草酸1 min→蒸馏水洗1 min→50%酒精1~2 min→醛品红染液5~15 min→蒸馏水洗→逐步提高浓度梯度，至95%酒精分色脱水→二甲苯→香胶封固剂封固。 实验结果与分析 图1、2、3、4为山羊皮三色染- 苏丹Ⅳ染纵切片，这种方法主要是对胶原纤维及脂肪的染色。从图1 中可以看出，原料皮表皮呈淡紫红色，毛根显黄色，紧贴毛囊的是红色的脂腺细胞[3]，毛根鞘的纵切面构造，周围有脂腺、汗腺和竖毛肌。毛根鞘是毛囊的内腔，在毛囊下部，毛根鞘逐渐变薄，它是进入毛囊深处的表皮延续部分。图2 可以看出浸酸进一步松散和分离了皮胶原纤维，进一步除去非纤维蛋白质，因为浸酸消除了裸皮粒面的皮垢，对色素、脂肪、及真皮表层的纤维间质进行了水解。由图3 可以看出浸灰后针毛毛根明显被脱去，因为用灰碱涂山羊浸水皮肉面时，硫化钠溶液渗入毛囊内，破坏或削弱了毛球与毛乳头的连接和毛根鞘对毛根的紧密包围，从而使毛根从皮内脱出，但绒毛毛根未脱尽，仍然有大量残余。浸灰裸皮呈膨胀状态，胶原纤维编织轮廓线不清晰。浸灰后网状层胶原纤维及纤维束呈膨胀状态，纤维间无空隙，纤维束间有一些空隙。图4 可以看出整体轮廓不清晰，颜色变浅，胶原纤维编织程度得到进一步的松散，脂肪颜色几乎看不见。图5、6、7、8 为山羊皮醛品红染色水平切片，这种方法主要是对弹性纤维染色。图5 可以看出弹性纤维分布比较紧密，多呈树枝状的网络结构，应该位于乳头层，因为弹性纤维三分之二以上部分分布于乳头层，尤其在毛囊、脂腺、汗腺、竖毛肌周围形成疏密不同的弹性纤维网。网状层与皮下组织间分布一层致密的弹性纤维，在水平方向上为连续的一片，几乎没有空隙[4]。从图6 中可以看出弹性纤维分布已经比较稀疏了，这是因为在浸酸过程中破坏了一部分弹性纤维。从图7 可以看到弹性纤维较粗壮，弹性纤维网络较密，但乳头层与网状层交接处几乎没有弹性纤维。在鞣前准备过程中破坏弹性纤维，有利于胶原纤维的松散，使成革柔软和丰满，因为弹性纤维在浸灰过程中对控制生皮的膨胀起重要的作用。从图8 中可以看出山羊皮臀部乳头层的弹性纤维网络因遭到软化过程中的破坏而较为稀疏。 试验不足及分析 本实验中醛品红染色颜色较深，导致纤维观察效果不是很好，结构不分明。原因可能是用50%酒精分散时间不足，水洗时间不够，以后要重点控制好各个染色步骤的时间和用量；还有部分图片有深