一种从废啤酒酵母中生产β―D―葡聚糖和甘露聚糖的新方法.docVIP

一种从废啤酒酵母中生产β―D―葡聚糖和甘露聚糖的新方法 　　【摘 要】β-D-葡聚糖和甘露聚糖对于人类健康有许多有益的作用，酵母细胞壁是其重要来源。啤酒废酵母泥是酿酒酵母中RNA提取的主要副产物。本文研究出一种以废酵母浆为材料分离β-D-葡聚糖和甘露聚糖的新方法。经过超声波法和高温高压处理后，β-D-葡聚糖是先用碱萃取后用蛋白酶酶解，收率和纯度分别为16.73%和76.82%。甘露聚糖是通过透析制备，最终产量和纯度分别为9.79%和64.39%。 　　【关键词】β-D-葡聚糖；甘露聚糖；酿酒酵母；酵母细胞壁；盐度 　　【Abstract】The polysaccharides β-D-glucans and mannans show numerous beneficial effects for the health of humans and animals and the cell wall of Saccharomyces cerevisiae is an important source of β-D-glucans and mannans. Spent yeast slurry is the major by-product of the process of extracting RNA from Saccharomyces cerevisiae. We have developed a new method to isolate β-D-glucans and mannans with the material of spent yeast slurry. After sonication and high temperature and high pressure treatment， β-D-glucans were extracted firstly with alkali， then with protease， and then dried， with a yield of 16.73% and a purity of 76.82%. Mannans were prepared through the process of concentration， dialysis， precipitation and drying， with a finally yield and purity of 9.79% and 64.39%， respectively. 　　【Key words】β-D-glucans；Mannans；Saccharomyces cerevisiae；Yeast cell wall；Salinity 　　0 概述 　　酵母多糖是从酵母细胞壁中提取的大分子碳水化合物的聚合物，主要成分是β-D-葡聚糖和甘露聚糖。β-D-葡聚糖包括（1，3）β-D-葡聚糖与少量的（1，6）连接葡萄糖和其他支链[1]。甘露聚糖通常以共价键和蛋白质结合，称为甘露糖蛋白[2]。 　　β-D-葡聚糖通常称为生物反应调节剂（BRM）[3]。β-D-葡聚糖可以作为免疫应答，抗癌，造血调控，保肝，降低胆固醇以及降血糖活性[4， 5-8]。β-D-葡聚糖也有抗氧化的作用和能会加速伤口愈合的作用[9，10]。细胞壁甘露聚糖也有粘接性能[11]和抗原变异[12]。鉴于多糖以上所有的特性和用途，前人已有很多研究。但是大多数都是β-D-葡聚糖和甘露聚糖单独提取。我们提出了一个同时生产两种产品的新方法。这个方法过程简单，高效和易于转换到大规模生产。 　　生产过程见图1。 　　1 实验 　　1.1 实验材料 　　固体含量为25%废酵母泥：南京同凯兆业生物技术有限公司提供。酶：沈阳诺维信生物技术有限公司。试剂均为国产分析纯。 　　1.2 分析方法 　　1.2.1 多糖的含量测定 　　采用苯酚硫酸法-与6%的苯酚浓度测定，于490nm紫外吸收处测定总糖，分别用葡萄糖和甘露糖为标准曲线定量[13]。 　　1.2.2 蛋白质的测定 　　通过凯氏定氮分析仪测定总氮（福斯特卡托，公司，瑞典）根据AOAC正式方法。由总氮含量乘以6.25计算蛋白质含量。 　　1.2.3 灰分的测定 　　干燥后的样品在600℃焚烧炉中测定灰分（林德伯格/蓝色M，美国）[14]。 　　1.2.4 含盐量的测定 　　用硝酸银滴定法测定盐，用作指示剂铬酸钾。 　　1.2.5 红外光谱 　　β-D-葡聚糖和甘露聚糖红外光谱分析在Nicolet 380光谱仪中进行（热电，美国）。样品KBr压片近似重量比为1：100[15]。 　　1.3 过程 　　1.3.1 预处理 　　由于废啤酒酵母浆包含一些杂质和无机离子。预处理是用