不同水体中瓦氏雅罗鱼的氨氮排泄率以及血液和组织中氨氮含量研究.docVIP

不同水体中瓦氏雅罗鱼的氨氮排泄率以及血液和组织中氨氮含量研究 　　摘要 该文比较了瓦氏雅罗鱼在高盐碱水体达里湖和淡水岗更湖水体中的氨氮排泄率以及血液、组织中的氨氮含量，结果表明：达里湖中瓦氏雅罗鱼氨氮的排泄率明显减少，而血液和组织中氨氮的含量并未见升高，由此表明，瓦氏雅罗鱼是通过减少氨氮排泄率来适应高盐碱环境。 　　关键词 瓦氏雅罗鱼；达里湖；岗更湖；氨氮 　　中图分类号 X524 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）04-0244-02 　　瓦氏雅罗鱼（Leuciscus waleckii）属鲤形目鲤科雅罗鱼亚科雅罗鱼属，分布于中国、蒙古、韩国和俄罗斯境内黑龙江流域，具有很强的耐盐碱特性，是达里湖仅存的2种经济鱼类之一。达里湖地处我国北方的严寒干旱地区，日照强，降雨少，蒸发强，风沙大，干湿期差异大，属于典型的高严寒旱区草原型湖泊。随着自然气候的变迁，湖泊萎缩、湖水盐碱度增高，高pH值、高碱度和高盐度等对湖中鱼类的生存造成严重的影响。 　　鱼类调节氮代谢能力及其排泄形式是适应高盐碱环境的关键。硬骨鱼类为排氨动物，淡水鱼的氮代谢终产物主要以氨氮（NH3/NH4+）的形式排出（占80%～90%），也排泄少量尿素氮。动物的氨氮排泄对环境具有高度的依赖性[1]，中华绒螯蟹幼体的氨氮排泄随着环境温度的上升而增加，随着水体盐度的增加而降低[2-3]。中华绒螯蟹在pH值上升至10.5以上时，血淋巴pH值升高，氨氮排泄速率下降[4]。当pH值升高时，虹鳟（Oncorhynchus mykiss）鳃部依赖Na+，K+-ATPase的Na+/NH4+速率降低，从而降低了氨氮的排泄速率[5]。瓦氏雅罗鱼生活在高盐碱环境达里湖中时，其鳃组织的Na+、K+-ATPase酶活性明显高于淡水岗更湖中[6]，其氨氮排泄率是否受到抑制，而体内血液和组织器官中的氨氮含量是否会升高，该试验通过比较瓦氏雅罗鱼在达里湖和岗更湖湖水中的氨氮排泄率以及血液、鳃、肝脏和肌肉中氨氮含量，初步探讨了瓦氏雅罗鱼的耐盐碱机理。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　试验用60尾瓦氏雅罗鱼（均重82.4 g±6.7 g）取自达里湖，分别饲养于达里湖水和岗更湖水中。饲养用玻璃缸的容积为60 cm×40 cm×40 cm。 　　1.2 试验设计 　　试验水体有2种，分别为岗更湖水、达里湖水，用玻璃缸盛水，每个缸随机放入6尾鱼，每组5次重复。试验共10 d，试验后3 d均不投喂饲料，以减少摄食对氮排泄的影响。试验最后2 d每天取10 mL水样（间隔24 h），用于测定水体中氨氮含量的变化，试验结束，取水样测定其主要水质指标；且分别从2个组随机各取出5尾鱼，采集血液和组织，分析血液和组织中的总氨氮含量（TAMM）。 　　1.3 样品采集 　　试验结束后，将鱼取出，注射器尾静脉抽血，将采集的血液置于抗凝剂处理过的Eppendorf管中，立即加入5% HClO4溶液，于5 000 r/min，4 ℃离心20 min，取上清，加1.5 mol/L K2CO3的溶液调节pH值至7，液氮冻存，再转移至-80 ℃保存。冰上快速解剖鱼，取鳃、肝和肌肉组织，放入液氮中，后转移至-80 ℃保存。 　　1.4 样品分析 　　水体中氨氮含量测定：采用酚-次氯酸盐分光光度法。氨氮分泌速率（JAMM）的测定：以每小时每克个体分泌氨氮的量表示，计算公式如下： 　　JAMM=V×（C2-C1）/（t×W） 　　式中，C2和C1分别为试验开始和结束时水中氨氮含量，V为试验水体积，t为试验时间，W为鱼体重。 　　主要水质指标测定：pH值用pH计测定，盐度用盐度计测量，碱度用0.02 mol/L的HCl标定。 　　血浆中总氨氮测定：测定前将血浆样品从-80 ℃取出，置于4 ℃冰箱融解，加1.5 mol/L K2CO3溶液调节pH值至7。采用北京利德曼生化技术有限公司生产的血氨测定试剂盒（谷氨酸脱氢酶两点法）测定所取血浆中的总氨氮含量。加样和测定过程都在4 ℃条件下进行。 　　组织中总氨氮测定：将组织样品从-80 ℃取出，液氮条件下研磨成粉状，加入5% HClO4溶液提取30 s，于3 000 r/min，4 ℃离心5 min，取上清，加1.5mol/L K2CO3溶液调节pH值至7，组织中的总氨氮含量测定同血氨的测定方法。 　　2 结果与分析 　　2.1 不同水体的主要水质指标 　　从表1可以看出，达里湖和岗更湖的水质有明显差异。达里湖湖水的总碱度和含盐量分别达55 mmol/L和6.8 g/L，属于典型的高盐碱水体，分别是岗更湖湖水的总碱度和含盐量的13和16倍。达里湖也属于高pH值水体，其pH值达9.40。但达里湖湖水的钙离子含量却低于岗更湖中