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- 2016-10-01 发布于湖北
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3 基因工程载体 3.1 质粒载体 3.2 λ噬菌体 3.3 单链DNA噬菌体 3.4 黏粒载体 3.5 其他载体 3.6 表达载体 载体:基因工程中携带外源基因进入受体细胞的“运载工具”,它的本质是DNA复制子。 作为载体必备的3个基本条件: I 能在宿主细胞内独立和稳定的自我复制 II 具有合适的限制性酶切位点 III 具有合适的选择标记基因 3.1 质粒载体 质粒:染色体外能自我复制的小型DNA分子。 广泛存在于细菌细胞中,也存在于霉菌、蓝藻、酵母和少数动植物细胞中。 大小1Kb-200Kb。 携带基因,可以赋予宿主某些生物特性: 抗生素抗性、降解复杂的有机物、产生限制酶和修饰酶等。 3.1.1质粒的一般特性 (1)质粒的分子特性 (2)质粒的复制类型 (3)质粒的不亲和性 (4)质粒的转移性 (1)质粒的分子特性 绝大多数是双链闭合环状DNA分子。 具有三种不同构型: ccDNA:闭合环状DNA,呈SC构型; ocDNA:开环DNA,呈OC构型; lDNA:线形DNA,呈L构型。 (2)质粒的复制类型 严谨型质粒:拷贝数较少,1-3个拷贝;受宿主染色体DNA复制的严格控制。 松弛型质粒:拷贝数较多,10-200个拷贝,有时可达700个拷贝。 (3)质粒的不亲和性 质粒的不亲和性:在没有选择压力的情况下,两种不同的质粒不能
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