成都大学大学生创新性实验计划项目申请表剖析.doc

附件1 项目编号 ______________ 成 都 大 学 大学生创新性实验计划 项目申请表 项目名称： 基于生物工程技术的卷叶贝母有效组分生产关键技术研究 项目负责人： 陈然 所在学院、年级： 生物产业学院生物工程07级1班 联系电话： 1座机电话号码05 电子邮件： 座机电话号码6@ 指导教师： 王跃华 项目起止时间： 起于：2000年10月 止于：2012年10月 填表日期： 二○〇九 年 十 月 十九日 成都大学教务处制 填表说明 1、《成都大学“大学生创新性实验计划”项目申请表》由立项负责人逐项认真填写，填写内容必须实事求是，表达明确严谨，空缺项要填“无”。并用A4纸打印，于左侧装订成册。 2、申请参加成都大学“大学生创新性实验计划”项目团队人数一般以2－3人为主，最多不得超过3人。 3、项目负责人填写完申请表后，必须请指导教师审核，并填写意见和签名。 4、《成都大学“大学生创新性实验计划”项目申请表》由申报学生所在学院初审，签署意见后（一式两份），由学院教务办一起报送教务处实践教学管理科。 5、如填表有不明事宜，请与教务处实践教学管理科联系和咨询。 联系电话：座机电话号码 项目名称 基于生物工程技术的卷叶贝母有效组分生产关键技术研究 申请经费 项目负责人 姓 名 学 号 所在学院、专业 班级 项目中分工 签字 陈然 座机电话号码1135 生物产业学院生物工程 07级1班 实验安排、操作、总结 项目成员 李頔 座机电话号码1143 生物产业学院生物工程 07级1班 数据整理，实验操作 舒平 座机电话号码1138 生物产业学院生物工程 07级1班 实验准备，操作 刘毓均 座机电话号码1214 生物产业学院生物工程 07级1班 实验准备，操作 指导教师情况 姓 名 王跃华 职称 教授 学历/学位 硕士 所在学院 生物产业学院 E-mail地址 Wangyaohua888@ 联系电话 1座机电话号码90 1.课题来源：科研 □教学 □设计 □工程 □自选 □其他（ ） 2.课题类别：□工学 □理学 □文学 □管理 □经济 □其他（ ） 项目简介和前期基础：（包括 外植体的选择?→?卷叶贝母无菌体系的建立?→?筛选出卷叶贝母鳞茎及愈伤组织诱导、增殖的最佳培养基和培养条件?→?秋水仙素处理不同浓度、时间以及处理方式的确定?→?秋水仙素诱导离体培养体系的建立?→?卷叶贝母四倍体的形态学、细胞学的鉴定?→?卷叶贝母四倍体细胞的筛选?→??卷叶贝母四倍体细胞悬浮体系的建立→?卷叶贝母四倍体悬浮培养物成分的提取、纯化、结构分析和含量测定→?对卷叶贝母四倍体悬浮培养产物进行全面系统的药理学和毒理学和安全性科学评价→?建立在离体培养条件下，大规模工业化生产卷叶贝母有效组分的关键技术。 6、研究方案 本课题的研究方法是依靠组织培养技术、多倍体诱导技术、细胞悬浮培养技术为支撑点，筛选出卷叶贝母愈伤组织和鳞茎分化增殖的最佳培养基配方和培养条件，研究出种子完成生理、形态后熟的最佳层积条件，采用将秋水仙素加入培养基中和制备成浸泡液两种方式诱导卷叶贝母同源四倍体，并运用细胞悬浮培养的技术建立高产、稳定的卷叶贝母四倍体细胞悬浮体系，最终实现工业化生产卷叶贝母药用成分的目的。 （1）建立卷叶贝母快速繁殖体系 通过对卷叶贝母各种外植体、激素配比、培养温度、光照强度、培养时间以及接种量等多方面筛选研究，确立卷叶贝母愈伤组织和鳞茎快速增殖的最佳培养基配方及培养条件，建立大规模的卷叶贝母无菌离体培养体系。 （2）建立卷叶贝母多倍体诱导技术体系 为了提高药材中有效组分的含量和增加药材的产量，选择生长状况良好的卷叶贝母愈伤组织团块和小鳞茎，以及已采用赤霉素并结合低温沙藏层积处理后完成生理和形态后熟的种子，使用将秋水仙素药剂加入培养基中和用秋水仙素溶液浸泡处理两种方法诱导卷叶贝母多倍体；并依据不同的诱导材料，确立出使用秋水仙素溶液的最佳浓度与处理时间。 （3）建立快速高产的卷叶贝母多倍体悬浮培养体系和多倍体培养产物成份累积及时空分布规律研究 采用植物形态学、组织学和细胞遗传学等技术对诱导后的材料进行多倍体鉴定，选择多倍体诱导率高、生长状况好和有效组分含量高的卷叶贝母材料进行悬浮培养。 依据使用卷叶贝母多倍体的材料，从基本培养基的种类、激素配比、接种量、光照条件、碳源、pH值等多方面进行深入研究，确立影响卷叶贝母多倍体细胞悬浮培养生长的因素。 测定培养细胞的活力，绘制出悬浮培养细胞的生长曲线，科学的确立多倍体悬浮培养的继代时间和生产周期。 定时取样检测悬浮培养细胞中生物碱和甾体皂甙化学物质的变化，弄清卷叶贝母有效组分的积累动态和时空分布规律。 开展生物转化研究，将悬浮培养基中的蔗糖浓度