酶工程复习分析.doc

酶工程复习 一、名词解释 1、诱导与阻遏:诱导是加进某种物质,使酶的生物合成开始或加速进行的过程。阻遏是 2、最适生长温度与最适生产温度:最适生长温度是该温度下,微生物细胞的生长速率最。 3、生长因子:细胞生长繁殖不可缺少的微量有机化合物,如aa, 嘌呤,嘧啶,激素 4、等电点沉淀 利用两性电解质在等电点时溶解度最低,以及不同的两性电解质有不同的等电点这一特性,通过调节溶液的pH值,使酶或杂质沉淀析出,从而使酶与杂质分离的方法称为等电点沉淀。 5、盐析沉淀 是利用不同蛋白质在不同的盐浓度条件下溶解度不同的特点,通过在酶液中添加一定浓度的中性盐,使酶或杂质从溶液中析出沉淀,从而使酶与杂质分离的过程。 6、酶分子修饰:通过各种方法使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术过程称为酶分子修饰。 7、分子内交联修饰:含有双功能基团的化合物(双功能试剂)如戊二醛、己二胺、葡聚糖二乙醛等,可以在酶蛋白分子中相距较近的两个侧链基团之间形成共价交联,从而提高酶的稳定性的修饰方法称为分子内交联修饰。 8、酶的有限水解修饰:在肽链的限定位点进行水解,使酶的空间结构发生某些精细的改变,从而改变酶的特性和功能的方法,称为肽链有限水解修饰。 9、酶的定点突变技术:定点突变技术是指在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的的操作技术。 10、侧链基团修饰:采用一定的方法(一般为化学法)使酶分子的侧链基团发生改变,从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法称为侧链基团修饰。 11、抗体酶(Catalytic antibody) ,又称催化抗体,是指通过一系列化学与生物技术方法制备出的具有催化活性的抗体,它除了具有相应免疫学性质,还类似于酶,能催化某种活性反应,是一种新型人工酶制剂,是一种具有催化功能的抗体分子。 多克隆抗体中单一抗体的量很小,要把这些不同的抗体分开很困难。用这种传统方法制备抗体效率低、产量有限。如果可以分离到抗体产生细胞的单克隆,然后使所有的抗体均来自同样的克隆,这样制备的抗体称为单克隆抗体。 专题1:工业生物技术的研究现状与发展趋势 什么是工业生物技术,工业生物技术产业的主要形式有哪些,现阶段工业生物技术发展的关键技术是什么? 答: 第一章 绪 论 1、什么是酶的最适 pH,它影响酶反应的机理是什么。 在一定的pH 下, 酶具有最大的催化活性,通常称此pH 为最适 pH(optimum pH)。 a.过酸或过碱影响酶蛋白的构象,使酶变性失活。 b.影响酶分子中某些基团的解离状态(活性中心的基团或维持构象的一些基团)c.影响底物分子的解离状态,故酶反应一般在一定的缓冲液体系中进行。 试述磺胺类药物的作用机理(竞争性抑制) 磺胺类药物是对氨基苯磺酰胺或其衍生物,它是对氨基苯甲酸的结构类似物,竞争性抑制二氢叶酸合成酶?。如果动物体内含有大量的对氨基苯磺酰胺,可与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶的活性中心,抑制细菌二氢叶酸合成。 简述酶活力测定方法 答: 步骤: (1)配制底物溶液。(2)确定反应条件。(3)反应开始,记时间(4)反应完毕注意终止反应。(5)测定产物的生产量或底物的减少量。 影响酶催化作用的因素是什么 1、底物浓度对酶促反应速度的影响2、酶浓度对酶反应速度的影响/3、温度的影响影响抑制剂的影响(,非竞争性抑制剂,反竞争抑制剂) (1)药物作用机理和抑制剂型药物的设计与开发:抗癌药 (2)对生物体的代谢途径进行人为调控,代谢控制发酵 (3)研究酶的活性中心的构象及其化学功能基团,不仅可以设计农药,而且也是酶工程和化学修饰酶、酶工业的基础 6、酶的催化作用专一性与高效性的机理是什么? 酶催化某一反应时,首先在酶的活性中心与底物结合生成酶-底物复合物,此复合物再进行分解而释放出酶,同时生成一种或数种产物。ES的形成,改变了原来反应的途径,可使底物的活化能大大降低,从而使反应加速。 酶与底物结合的方式有:学说: 诱导契合:该学说认为酶表面并没有一种与底物互补的固定形状,而只是由于底物的诱导才形成了互补形状. “三点结合”: 酶的催化作用可能来自5个方面,即广义的酸碱催化、共价催化、邻近效应及定向效应、变形或张力以及活性中心为疏水区域。(详细见) 抑制剂与酶蛋白以非共价方式结合,引起酶活性暂时性丧失。抑制剂可以通过透析等方法被除去,并且能部分或全部恢复酶的活性。 ︴ 竟争性抑制 可逆抑制作用 ︴ 非竟争性抑制 ︴反竞争性抑制作用 竞争性抑制剂 非竞争性抑制剂: 反竞争性抑制剂: 9、简述酶的酶组成、结构 (1)的组成 酶的组成 辅因子 酶的 二级结构为在一级结构中相近的氨基酸残基间

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