第11讲高效液相色谱法测定饮料中的咖啡因.pptVIP

仪器分析实验 荧光法测定维生素B2药物中核黄素含量 【实验目的】 1．了解荧光分光光度计的主要结构及工作原理。 2．掌握荧光分析方法。 【实验原理】 维生素B2 在230～490 nm范围波长的光照射下，激发出峰值在526 nm左右的绿色荧光，在 pH为 6～7范围内荧光强度最大。基于上述性质建立核黄素的荧光分析法，选择合适的激发波长、荧光波长和实验条件，即可进行定量测定。 在稀溶液中，当入射光强度、样品池厚度、仪器工作条件不变时，测得的荧光强度与荧光物质的浓度成正比。 If = κc 【实验步骤】 1. 实验条件的选择 （1）激发光波长和荧光波长的选择 25 mL 比色管 + 1.00 mL 100 μg·mL－1 核黄素标准溶液 ————————→ 摇匀——→ 固定荧光波长526 nm—→扫描激发波长（220～500 nm ）。 固定激发波长为442 nm —→扫描荧光波长（400～700 nm 范围），确定最大荧光强度。 反复：固定激发扫发射，固定发射扫激发，确定最佳激发和发射波长。 （2）酸度的选择 （25 mL 比色管） 2．标准曲线的绘制（25 mL 比色管） 3．样品测定 （1） 药片