第三章—植物脱毒技术详细分析.pptVIP

草莓 病毒种类 草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓斑驳病毒(SMoV)、草莓轻型黄边病毒(SMY- EV)、草莓皱缩病毒(SCrV) 热处理法脱毒 茎尖培养脱毒 扩大繁殖与生根培养 茎切段生芽扩大繁殖法 叶切块生芽扩大繁殖法 移栽 3、微型薯生产技术 单茎段扩大繁殖 茎段带有1-2个叶片和液芽 22℃、16h、1000lx； 微型薯诱导 激素、黑暗、温度 CIP：MS+CCC、BA 香豆素代替CCC、BA；白糖代替蔗糖 试管繁殖图示 温室和底网畦生产微型薯 二、果树 苹果 营养繁殖为主，一旦被病毒侵染，终生带毒 苹果病毒通过嫁接传染，随着接穗、砧木、苗木远距离传播 病毒在细胞内寄生和增值，传染到树体其他部位，破坏树体正常生理机能，长势减退，产量下降，品质变劣，直至死亡。 1、苹果病毒的种类 非潜隐性病毒 潜隐性病毒 苹果退绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒、苹果茎沟病毒 我国主产区病毒：苹果锈果类病毒、苹果花叶病毒、绿皱果病毒、退绿叶斑病毒、茎痘病毒、茎沟病毒。 2、离体繁殖技术 步骤： 外植体接种 起始培养形成芽丛和嫩茎 继代培养 生根培养 驯化移栽 （1）外植体培养物的建立和起始培养 1）外植体的来源 茎尖和茎段 2）适宜的取材时间和预处理 叶芽萌动——发育枝中上段——流水冲洗——单芽——剥鳞片——表面消毒——冲洗——剥离茎尖——接种 3）培养条件 BA0.5-1.5；NAA0.01-0.05 （2）继代培养 MS+BA0.5-1.0+NAA0.05 周期：5-7周 培养条件：一般 （3）生根培养 新梢叶片展叶，取3-4cm长的新梢，浸入IBA100，30min，插入1/2MS培养基，3周后即可生根。 （4）驯化和移栽 驯化 根长1cm，转强光20d，去瓶塞，适应低湿 移栽 去培养基——营养钵——温室或大棚 基质：保水、透气 3、影响茎尖培养的因素 初代培养的效率 消毒效果、控制褐变 继代培养 品种类型、试管苗生理状况 提高生根率 材料本身的状况、生根条件 预防玻璃化 三、观赏植物 蝴蝶兰 大花蕙兰 石斛兰 卡特兰 1、材料的选择和处理 外植体：顶芽和腋芽，幼叶 接种培养 2、植株再生途径 外植体直接诱导丛生芽 MS+BA0.5+KT1.0+NAA0.2 MS+BA2.0+NAA0.5 培养45d；降低无机盐提高腋芽的萌发率 由外植体直接诱导原球茎 通过愈伤组织形成原球茎 3、原球茎的诱导 茎尖、叶片、花梗 愈伤组织形成原球茎 茎尖：KC+BA0.5-2+NAA0.01-0.5 叶片：1/2MS+BA2+NAA0.5+CM50 4、原球茎的增殖与分化 接种的茎尖4-6 周后可形成原球茎，以未抽芽的原球茎为外植体进行继代培养，不断进行原球茎的增殖。 培养基：MS+BA0.1-5+NAA0.5-1+香蕉或椰汁液 四、林木 毛白杨 无菌体系的建立 外植体：休眠芽 过程：5mm一年生枝——切1.5-2cm节段，带一个休眠芽——消毒处理——茎尖剥离 培养基：MS+BA0.5+水解乳蛋白100；5-6d后转诱导分化培养基：MS+BA0.5+NAA0.2+赖氨酸100 环境：光照弱，2-3月即可分化芽。 五、药用植物 枸杞 初代培养 继代增殖培养 生根培养 试管苗的移栽 第三章 植物脱毒技术茎尖分生组织培养 为什么要培育脱毒苗？ 由病毒引起植物产量和品质退化的事例甚多。多数植物都受到一种或几种病毒侵染，且带毒株比率高。病毒对寄主植物造成毁灭性危害,导致大幅度减产,甚至全株死亡。潜隐性病毒侵染植物造成症状不明显的慢性危害，不易被发现，尤其危险。受病毒侵染的植物全身终身带毒，目前尚无有效药物可以治愈。利用植物茎尖等方法脱毒，培育无病毒苗，是解决病毒危害的有效途径。 什么叫无病毒苗？ 是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。要脱除植物体内所有病毒包括未知病毒是不可能的，准确地说“无病毒苗”是指“特定无病毒”。对被病毒侵染的植物优良品种的植株进行脱毒，培育出无病毒母株，并在不易受再侵染的条件下无性繁殖，是获得无病毒苗的根本途径。 烟草黄瓜花叶病毒“脉坏死症” 感 染 病 毒 病 的 郁 金 香 第一节 茎尖培养脱毒 一、病毒在植物体内的分布 病毒侵染到植株的叶片后,经过一段时间,即向附近细胞增殖转移,转移速度很慢,每小时只有几微米。当叶片内病毒浓度增大到一定量时,就转移到韧皮部,随后通过维管束转移到其他部分。 由于植株生长点附近病毒的浓度很低，甚至没有。所以，应用茎尖培养脱毒研究获得成功。由于茎尖培养脱毒效果好，后代遗传性稳定，所以是目前生产上最常用的脱毒措施。