第十章 细菌病毒的遗传.docVIP

第一节 细菌和病毒遗传研究的意义 内容： 一、细菌 二、病毒 三、细菌和病毒在遗传研究的意义 四、细菌和病毒的拟有性过程 一、细菌 细菌是原核生物，没有明确的核膜和线粒体等细胞器。由于其遗传简单和独特，成为 1、生长特点 20分钟一个世代。 ●易突变。且突变易鉴别。 2、 ●染色体为裸露的DNA。 DNA。F因子就是一种质粒。 3、研究细菌遗传的方法 4种： ●完全培养基。用于突变型细菌的培养。 ●选择培养基。用于鉴定突变类型。 ●补充培养基。用于具体突变类型的确定。 细菌遗传研究方法有涂布法和影印法两种。 （1）涂布法（如右图解）。 ●繁殖。在液体培养基上培养细菌，摇动培养基使细菌裂殖呈几何级数的增加，并通过测OD值使增殖达到对线期。 ●涂板产生菌落（colony）。107个细胞，成为肉眼可见的菌落。菌落具有共同的遗传组成，如果某个细胞突变，菌落也应有所不同，所以可进行鉴定。如引起小鼠肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae）野生的菌落大而光滑，而突变型的则是小而粗糙。 ●菌落突变鉴定。主要是通过对菌落形状、颜色和大小等方面的观察，以鉴定突变体。 取少量的菌液（菌落） ↓ 在液体培养基上培养（繁殖） ↓ 稀释 ↓ 固体培养基培养 ↓涂布均匀 长出新菌落（遗传基础一致） ↓ 检查变异 涂布法图解 2） 是由Lederbery J和Lederberg EM于1952年 a. 先在母板（Master plate） b. 制作一个印具（比母板略小）。 c. 配制各种特定的营养缺乏培养基。 d. 用印具先在母板上印，把菌落吸附在丝绒上，再把这个印具印到不同成分培养基上。 e. 鉴定是否生长，如不长为此种营养缺陷型。 制作母板 ↓ 配制各种不同的培养基 ↓ 用模版影印到不同的培养基上 ↓ 观察生长情况 影印法图解 二、病毒 只有一个染色体，实际上是DNA或RNA， ●分类 一般分为动物病毒、植物病毒和细菌病毒（称为噬菌体（phage））等。 三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性 1、, 世代短。 细菌20分钟一代，病毒一小时可繁殖百个。 2、 一个试管可装很多; 3、, 只含裸露DNA或RNA。适用基因结构和功能研究。 4、 105, 至少需上百个培养皿，但只要培养基上加所希望突变的抗性物质，就有望短期鉴定出来。 5、 6、 四、细菌和病毒的拟有性过程 　　不经过减数分裂和授精作用而导致遗传物质的重组，叫做拟有性过程。 细菌拟有性过程的方式主要有转化和接合。病毒的拟有性过程称为转导。 第二节 细菌的遗传分析 内容： 一、转化 二、接合 一、转化 转化（transformaton）DNA片段通过重组参入自己的染色体组过程。只有当参入DNA片段产生新的表现型时，才能测知转化的发生。 ? ●发现 首先由Griffith（1928）1949年AveryDNA。 ? ●转化的过程 ○供体DNA与受体细胞间的最初相互作用 有4个因素影响最初的相互作用 a. 转化片段大小。 肺炎双球菌的成功转化，转化DNA片段至少有800bp，枯草杆菌至少16000bp。 b. 形态。 双链DNA c. 浓度。 对某一个特定的基因来说，供体DNA分子数目与细胞成功的转化之间有一定的相关。一般在转化一定数目DNA之前，两者成正比。如从一个抗链霉素细菌菌株提取DNA转化链霉素敏感的细胞，直到每个细胞含有10个DNA分子之前，抗性转化体的数目一直与DNA分子存在的数目直接成比例。 DNA分子数 10，原因可能是细菌细胞壁有固定的DNA接受座位，一旦饱和，浓度就不再影响了。 d. 生理状态。 处于感受态 competence 。DNA合成。 ○转化DNA的摄取和整合 包括结合穿入、联会和整合 a.? 结合与穿入（binding and penetration）。经历DNA酶或冲淡去掉）、稳定结合和纵长被细菌摄取等过程。摄取时由外切酶或DNA移位酶（translocaes） b.? 联会。单链DNA进入后与其相应的受体DNA片段联会。联会紧密程度依亲缘关系而异。 c. 整合。单链DNA与受体DNA对应位点的置换而稳定地参入 incorporate 到受体DNA中（如下图） 二、接合 1、F因子 接合（conjugation） donor）—“ receptor —“雌性”的过程。 ●发现 1946 Lederberg和Tatum在大肠杆菌细胞之间发现通过接合可以交换遗传物质。 ○试验（实验过程）步骤（图10-5） a. 选材。选择双缺陷型菌株，分别是： A菌株 met-bio- ，甲硫氨酸和生物素缺陷型 B菌株 thr-leu- ，苏氨酸和亮氨酸缺陷型 选择双缺陷型目的避免回复突变的引起的误差。（回复突变率 10-12 b. 混合培