糖脂蛋白质还原实验.docVIP

实验 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 教学目的 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。 实验原理 1．可溶性还原糖+斐林试剂 （浅蓝-棕-）砖红色沉淀 呈色反应 2．脂肪+苏丹Ⅲ染液 橘黄色（+苏丹Ⅳ染液 红色） 3．蛋白质+双缩脲试剂 紫色反应 实验程序 一、可溶性还原糖的鉴定 选材：含糖类较高、白色或近于白色的植物组织。 制浆 制备组织液 过滤（用一层纱布） 取液 呈 色 反 应 （注：斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后使用） 结论：可溶性还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀。 关键步骤：斐林试剂现用现配及用量。 二、脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡3-4小时）将子叶削成薄片 （1）最理想的薄片 （2）在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液（2-3min） 制片 （3）去浮色 （4）制成临时装片 观察：在低倍镜下寻找已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。 结论：脂肪能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色。 关键步骤：子叶削成理想薄片。 三、蛋白质的鉴定 选材与制备组织样液：卵清或黄豆（浸泡1-2d） 呈 色 反 应 结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。 关键步骤：先加试剂A再加试剂B。 实验的注意事项 还原性糖：分子中含有醛基的糖。如葡萄糖、果糖、麦芽糖。但是蔗糖不是。 斐林试剂很不稳定，帮应将组成斐林试剂的甲液（0．1g/ml的NaOH溶液）和乙液（0．05g/ml的CuSO4溶液）分别配制、储存，使用时，再临时配制，将4-5滴乙液滴入2ml甲液中，配完后立即使用。 双缩脲试剂的使用，应先加试剂A（0．1g/ml的NaOH溶液），造成碱性的的反应环境后，再加试剂B（0．01g/ml的CuSO4溶液）。否则，紫色会被Cu OH 2的蓝色遮蔽。 【同类题库】 1．在还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，最佳的一组实验材料是 ①甘蔗的茎 ②油菜子 ③花生种子 ④梨 ⑤甜菜的块根 ⑥豆浆 ⑦鸡蛋清 A．④⑦⑥ B．⑤①⑦ C．①②⑥ D．④③⑥ 2．使用斐林试剂检验还原性糖的正确顺序是（ ） ①制组织样液 ②加入2ml 0.1g/ml的NaOH溶液 ③加入0.01g/ml CuSO4溶液 ④加入0.05g/ml CuSO4 溶液 ⑤煮沸2 分钟 ⑥出现砖红色沉淀 A．①→②→③→⑤→⑥ B．①→（②+③）→⑤→⑥ C．①→②→④→⑤→⑥ D．①→（②+④）→⑤→⑥ 3．用斐林试剂鉴定可溶性还原性糖时，溶液的颜色变化过程为（ ） A．浅蓝色→棕色→砖红色 B．无色→浅蓝色→棕色 C．砖红色→浅蓝色→棕色 D．棕色→绿色→无色 4．有关斐林试剂和双缩脲试剂的说法正确的是（ ） A．两者的NaOH浓度相同 B．两者的CuSO4浓度相同 C．实验时只能采用课本中给定的浓度 D．用两者鉴定物质时都不需要加热 5．鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品，需用的化学试剂是（ ） A．斐林试剂 B．苏丹Ⅲ溶液 C．双缩脲试剂 D．红墨水 6．（多选）鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品，需用的化学试剂是（ ） A．斐林试剂 B．苏丹Ⅲ溶液 C．双缩脲试剂 D．红墨水 7．下列能与斐林试剂反应生成砖红色沉淀的是（ ） ①葡萄糖 ②果糖 ③蔗糖 ④麦芽糖 ⑤淀粉 ⑥纤维素 A．①②⑤ B．②③④ C．①⑤⑥ D．①②④ 8．（多选）下列关于实验操作步骤的操作中，正确的是（ ） A．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B．脂肪的鉴定实验中，需用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C．鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液后再加入乙液 D．用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂A液和B液，要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且现配现用 E.实验前最好检测一下蔗糖溶液和葡萄糖溶液的纯度 9．下列物质中，与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应最明显的是（ ） A．苹果组织样液 B．豆浆 C．浸软的油葵种子 D．马铃薯组织样液 10．在使用斐林试剂和双缩脲试剂来鉴定组织中还原糖和蛋白质实验中，两种试剂的主要区别是（ ） 配制时所用的CuSO4．NaOH溶液浓度都不相同，加入到组织样液的时间顺序也不同 配制时所用的CuSO4．NaOH溶液浓度都相同，只是加入到组织样液的时间顺序不同 配制时所用的CuSO4溶液浓度不相同，加入到组织样液的时间顺序也不同 D．配制时所用的NaOH溶液浓度不相同，加入到组织样液的时间顺序也不同 11．在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，下列有关实验操作步骤的叙述中，正确的是（ ） A．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B．脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成黄色的脂肪滴 C．鉴定可溶性还原糖时，要加入