第四章种子的扩大培养详细分析.ppt

第四章 种子的扩大培养 本章学习目的和要求 1、掌握种子扩大培养的目标与要求。 2、掌握种子扩大培养的条件。 3、掌握种子制备过程的技术概要。 4、了解常见种子制备过程实例。 从保藏在试管中的微生物菌种逐级扩大为生产用种子是一个由实验室制备到车间生产的过程。 其生产方法与条件随不同的生产品种和菌种种类而异。 种子扩大培养应根据菌种的生理特性，选择合适的培养条件来获得代谢旺盛、数量足够的种子。 第一节 种子扩大培养的目的与要求 一、概述 1、种子扩大培养：指将保存在沙土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。 这些纯种培养物成为种子。 一、概述 2、种子扩大培养的意义 （1）为发酵生产提供冲突的代谢旺盛、生命力强的种子。 （2）有效地缩短主发酵罐的发酵周期。 3、种子扩大培养的目的 （1）接种量的需要 （2）菌种的驯化 （3）缩短发酵时间、保证生产水平 二、发酵生产中对种子的要求 发酵生产过程中的种子必须满足以下条件： （1）菌种细胞的生长活力强，移种至发酵罐后能迅速生长，迟缓期短； （2）生理性状稳定； （3）菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求； （4）无杂菌污染； （5）保持稳定的生产能力。 生产中主要对以下几方面进行稳定检查： （1）细胞或菌体的外部特征：对于单细胞，要求菌体健壮、菌形一致、均匀整齐；对于霉菌、放线菌，要求菌丝粗壮、对某些染料着色力强、生长旺盛、俊熙分枝情况和内含物情况好。 （2）生化指标：主要包括种子液的糖、氮、磷的含量和pH变化与正常的基质消耗曲线相近。 （3）产物生成量 （4）酶活力：种子液中某种酶的活力，与目的产物的产量有一定的关联。 第二节 种子培养的条件 一、影响种子质量的因素及控制 生产过程中影响种子质量的因素通常有：孢子的质量、培养基、培养条件、种龄、接种量。 一、影响种子质量的因素及控制 1、培养基 生产过程中经常出现种子质量不稳定的现象，其主要原因是：原材料质量波动。 此外，地区不同、季节变化和水源污染，均可造成水质波动，影响种子质量。 菌种在不同固体培养基上可呈现多种不同代谢类型的菌落，氮源品种越多，出现的菌落类型也越多，不利于稳定生产。 一、影响种子质量的因素及控制 针对以上影响因素，提出如下的解决措施： （1）培养基所用原料要经过发酵试验合格才可使用。 （2）严格控制灭菌后培养基的质量。 （3）斜面培养基使用前，需在适当温度下放置一定时间。 （4）共生产用的孢子培养基要用比较单一的氮源，作为选种或分离用的培养基则采用较复杂的有机氮源。 一、影响种子质量的因素及控制 种子培养基应该满足的条件： （1）营养成分适合种子培养的需要 （2）选择有利于孢子发芽和菌体生长的培养基。 （3）营养上要易于被菌体直接吸收和利用。 （4）营养成分要适当丰富和完全，氮源和维生素含量要高。 （5）营养成分要尽可能与发酵培养基相近。 一、影响种子质量的因素及控制 2、培养条件