毒物第四章要点分析.ppt

新疆医科大学药学院药分分析教研室 4，应用 药物分析、 毒物分析等 气相色谱系流动相为气体的一类色谱仪器分析。常用用H2和N2。有高选择性、高灵敏性、用样量少、分析速度快。适用于组分复杂和具有挥发性的混合物和微量组分，在毒物分析、体内药物分析和兴奋剂检测 GC-MS 等领域广泛应用。 应用 ⑴，环境污染物、食物添加剂、农药残留量; ⑵，药物组份 如挥发油各种组份 、水分、杂质、溶剂； ⑶，体内药物分析、兴奋剂和毒品。 在经典色谱和GC的理论基础上发展形成。在自动化、分离能力、速度及适用范围等方面有飞跃进步。 1，仪器系统：高压输液泵和梯度洗脱系统；进样器 六通进样阀 ；检测器 UV、NP、IR、MS… 等组成  仪器结构⑴, 载气系统⑵, 进样器系统⑶, 柱系统：普通填充柱:F 3-6mm,L 2-4m,毛细管柱:F 0.1- 0.5mm, L 10-200m,有空心和填充两类 。⑷, 检测系统 3，应用 体内药物分析、中药成分分析、毒物分析…，分析血清、血浆、尿、全血、组织等不同试样中的多种类型药物、毒物及代谢产物。 3.1，HPLC-IR联用 测定生物样品的兴 奋剂和毒品 六、质 谱（Mass spectra，MS） 质谱仪是一种将原子、离子或分子转变成带电离子，然后在质量分析器中使其分离，获得按质量顺序排列的图谱，横坐标为离子质量m和电荷e之比 质荷比m/e ，纵坐标为相对丰度 以基峰的离子电流强度作为100 。GC-MS、HPLC-MS广泛应用于毒物分析。 1，仪器结构 1.1 离子源 将进样系统引入的样品分子转化成离子。由于离子化所需要的能量差异很大，对不同的分子应选择不同电离方法。给样品较大能量的电离方法称硬电离方法，较小能量的电离方法为软电离方法，后一种方法适用于易破裂的样品。离子源有多种，如电子轰击、化学电离、电喷雾等。 1.2，质量分析器 质量分析器位于离子源和检测器之间，依据不同方式将样品离子按质荷比 m/z 分开。主要类型有：磁分析器、四极滤质器、飞行时间分析器等。 2，应用举例 比较内标法和外标法的优缺点和适用情况？答案要点:外标法:优点:操作计算简便;不必用校正因子,不必加内标物,常用于日常分析.缺点:进样量必须准确,仪器必须有良好的稳定性.若处理过程相对简单,用外标法较为合适,简单方便. 内标法:优点:进样量不严格要求,可抵消因操作条件变化而引起的误差,不受试样中其它组分峰的干扰.缺点:必须加入一个合适的组分 内标 到样品中.对于生物样品等涉及到多个转移步骤的,使用内标法可以规避许多由于操作不均匀所引入的误差.  工作方式 ⑴、薄层工作：制板、活化、点样、喷雾显色、紫外照射、目测； ⑵、固定斑点扫描：采用单波长扫描，得到吸收光谱、反射光谱或荧光发射光谱。用对照品对照，用于定性鉴别和寻找定量分析测试条件。 ⑶、斑点双波长直线扫描 行扫描 ：双波长测定可消除固定相产生的噪音。获得比较光滑的色谱曲线与积分峰面积。通常用对照品采用工作曲线法、内标法或外标法，依据A-C曲线或F-C曲线作定量分析。 ⑷、斑点双波长锯齿扫描：锯齿扫描可克服行扫描时因斑点形状不同引起的误差。色谱曲线积分峰面积定量，通常用对照品采用工作曲线法、内标或外标法定量分析。 ⑸、常规方法：“双波长”+“锯齿扫描”透射或反射法，可获得较满意的色谱曲线和良好的线性关系及良好的重现性。 Chapter three Gas chromatography 气相色谱法 §3-1 analitical process of gas chromatography 气相色谱分析流程 气相色谱流程 1、载气系统：包括气源、气体净化、气体流速的控 制和测量； 2、进样系统：包括进样器、气化室； 3、色谱柱：柱体、固定相； 4、检测系统：包括检测器、放大器、记录仪，有的 还带有数据处理装置。 载气系统 进样系统 色谱柱 检测系统 温控系统 随着载气的流动，溶解、挥发,或吸附、脱附的过程反复地进行。 Animation 动画 斜率 K 对称峰 前沿峰 拖尾峰 Animation 动画 Animation 动画 Animation 动画 Chapter four High Performance Liquid chromatography HPLC 高效液相色谱法 高效液相色谱（HPLC） 一、Feature of HPLC 高效液相色谱法的特点 特点：高压、高效、高速 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。 二、 process and main assembly of HPLC 流程及主要部件 1、 process 流程 2、main assembly 主要部件