超高效液相色谱法测定卡马西平的血药浓度.docVIP

超高效液相色谱法测定卡马西平的血药浓度 　　摘要：目的：建立超高效液相色谱法测定血清中卡马西平的质量浓度。方法：血样经乙醚萃取后，经WATERS BEH C18（2.1×50mm，1.7μm）分离，甲醇-水为流动相进行色谱分析，检测波长为214nm。结果：本方法线性范围为1.0-20.0μg/mlμg/ml（r=0.9948），高、中、低血样的平均回收率分别为102.3%、103.2%、100.8%，日内、日间RSD小于10%。结论：本法操作简便，回收率高，精密度好，适用于临床常规检测卡马西平的血药浓度。 　　关键词：超高效液相色谱；卡马西平；血药浓度 　　UPLC determination of Carbamazepine concentrations in human serum 　　Abstract Objective： To establish a UPLC method for detecting carbamazepine concentration in serum. Method： Carbamazepine was extracted from serum with diethyl and separated using a WATERS BEH C18（2.1×50mm，1.7μm）. Mobile phase was a mixture of methanol and water and the detected wavelength was at 214nm. Result： The linear range of carbamazepine was from 1.0μg/ml to 20.0μg/ml， r=0.9948. The recovery rate of low、moderate、high concentrations were 100.8%、103.2%、102.3%. The intraday and interday RSD were all less than 10%. Conclusions： This method was simple， accurate， precise and suitable for monitoring blood-drug concentration of carbamazepine. 　　Key words： UPLC carbamazepine blood drug concentration 　　卡马西平（Carbamazepine，CBZ）于1970年开始用于癫痫治疗，是单纯及复杂部分性发作的首选药，目前广泛应用于三叉神经痛和舌咽神经痛发作、躁狂-抑郁症、中枢性部分性尿崩症和乙醇成瘾的戒断综合征。卡马西平口服吸收缓慢且不规律，使用周期长，经常合并用药[1]。由于本品诱导自身代谢的个体差异，抗癫痫作用起效时间相差很大，其有效血药浓度为4～12μg/ml（20～50μmol/L）[2]。由于其化学结构和三环类抗抑郁药相似，可能会也激发潜在精神病以及老年人的精神紊乱或激动不安。常见的不良反应为视力模糊、复视、眼球震颤等中枢神经系统反应，且发生率随着血药浓度的增高（大于8.5～10μg/ml）而增多[3]。临床应用为获得有效浓度控制癫痫发作又无明显不良反应，需常规监测卡马西平的血药浓度。 　　抗癫痫药物的测定方法有紫外分光光度法（UV）、薄层色谱分析（TLC）、酶联免疫法（EMIT）、荧光偏振免疫法（FPIA）和高效液相色谱法（HPLC）。高效液相色谱法具有灵敏、精确、同时测定多种药品等优点，在药物血药浓度监测中越来越常用。超高效液相色谱法（UPLC）较HPLC法具有快速、高分离度、高灵敏度、试剂成本低等特点，可以将分析能力迅速提升到20～30个样品/小时。本实验参考HPLC相关文献[4-8]拟建立血清中卡马西平的UPLC测定方法，并进行全面的方法学确证和评估，为推测卡马西平的治疗窗提供可行方法和理论依据。 　　1仪器与试药 　　1.1 仪器：WATERS Acquity UPLC超高效液相色谱仪（美国WATERS公司），包括WATERS Acquity UPLC PDA 检测器、Empower2色谱数据工作站；L8W离心机（上海跃进医疗器械厂）；WXH微型旋涡混合器（上海跃进医疗器械厂）；数显三用恒温水箱HH-W420（金坛市科析仪器有限公司）。 　　1.2试药：卡马西平对照品（Acros Organics，批号：A0272746，含量：99%）；甲醇为色谱纯，乙醚为分析纯，水为去离子水。 　　1.3溶液配制 卡马西平对照品溶液的配制：精密称取卡马西平对照品10mg于100ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容，配置成浓度为100μg/