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- 2016-10-16 发布于湖北
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神经节苷酯的提取分离 什么是Gls? 神经节苷脂 ganglioside是含唾液酸的糖神经鞘脂。 结构为:半乳糖-N-乙酰半乳糖胺-半乳糖-(葡萄糖-神经酰胺)-唾液酸 Gls 神经节苷脂(Gls)是存在于细胞膜表面的一类酸性糖脂,对神经系统的发育再生至关重要,Gls结构复杂,目前只能依赖生物提取方法获得。各种哺乳动物脑组织中Gls含量丰富,是首选材料。分离过程包括总脂提取、Gls萃取和层析等步骤,目前已有不少分离和提取方法,本文对其中的一些共性问题进行了综述。层析是纯化Gls的关键,其目的为最大限度地去除磷脂、蛋白脂等,其方式多种多样。 神经节苷酯的分离纯化: 有关资料表明: 从猪脑提取纯化GM1; 从兔肝提取GM2; 从猪肝提取GM1和GD3; 狗肝中GD1a、GT1b含量较大。 Ⅰ离心柱法: ㈠-粗品Gls的制备:(用猪脑和鼠脑两种材料,相同方法) 离心液相层析柱: 新鲜猪脑[混合溶液]→[4℃,提取3次]离心→上清液[浓缩]→浓缩液[冷藏]→[-20℃] 过滤→滤液[混合液]→[Floch分配]上层液[浓缩,透析]→[冷冻干燥]粗Gls ⑴-----500g新鲜猪脑,以10倍体积的氯仿:甲醇混合液(1:1,V/V),相继在电动匀浆机和超声波细胞粉碎机中匀浆,在4℃下搅拌提取过夜,离心取上清液,沉淀物用上述混合液再次匀浆,反复提取3次。合并各
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