第一代基因测序资料.pptVIP

第一代DNA序列测定 DNA测序技术的诞生和发展 1980年，Sanger和Gilbert 因建立DNA测序技术而获得诺 贝尔化学奖（Sanger是第2次获得诺贝尔化学奖 ）。 1977年，美国哈佛大学生化学家Walter Gilbert发明DNA化学降解法测序技术(Maxam 和Gilbert,1977)。 1977年，英国剑桥医学研究会的分子生物学实验室Frederick Sanger 发明双脱氧链终止法DNA测序技术(Sanger和Coulson)。 DNA测序技术的诞生（第一代DNA测序技术） 1.1 化学降解法 在该方法中，一个末端被放射性标记的DNA片段在5组互相独立的化学反应中分别被部分降解，其中每一组反应特异地针对某种碱基。因此生成 5 组放射性标记的分子，每组混合物中均含有长短不一的 DNA分子，其长度取决于该组反应所针对的碱基在原 DNA片段上的位置。最后，各组混合物通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离，再通过放射自显影来检测末端标记的分子。 1.1 化学降解法 准确性较好，易掌握，因此用得较多。且所测序列来自DNA分子而不是酶促合成产生的拷贝，排除了合成时造成的错误。但化学降解法操作过程较麻烦，逐渐被简便快速的 Sanger法所代替。 双脱氧法(Dudeoxy sequence analyses) 双脱氧法又称末端终止法，用于单链