第9章 酶促反应动力学 酶促反应动力学 研究各种因素对酶促反应速度的影响。 影响因素包括有 酶浓度、底物浓度、pH、温度、 抑制剂、激活剂等。 单底物、单产物反应 酶促反应速度用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示 反应速度取其初速度,即底物的消耗量很小(一般在5﹪以内)时的反应速度 一、底物浓度对反应速度的影响 矩形双曲线 (一)米-曼氏方程式 米氏方程推导如下 v= K3[ES] (1)式 由酶促反应的饱和现象 知Vmax= K3 [E]T [E]T=([ES]+[E]) (4)式 将(1)和(3)式代入(4)式整理得 关于米氏方程的讨论 (1)由米氏方程知,酶促反应初速度v与底物浓度[S]的关系曲线为直角双曲线,此双曲线的二个渐近线为v=Vmax和[S]= -Km (续) (2)当底物浓度较低时,([S]Km)Km+[S]≈Km v=Vmax[S]/Km, 若酶的总浓度不变则进一步有v与[S]成正比,即一级反应。 2. Km可近似表示酶对底物的亲和力; 4. Vmax 定义:Vm是酶完全被底物饱和时的反应速度,与酶浓度成正比。 Vmax=0.5?mol/min, 1 ?g纯酶(Mr:92000) 求转换数 (三)Km值与Vmax值的测定 双倒数作图法(double recipr
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