论文名称(中文) 脂多醣体抑制肝醣合成酶激酶.docVIP

論文名稱 中文 脂多醣體抑制肝醣合成酶激酶-3β以降低自發性凋亡進而誘導嗜中性球增多症 論文名稱 英文 Lipopolysaccharide causes blood neutrophilia by preventing constitutive apoptosis following glycogen synthase kinase-3β inactivation 研究生 中文 楊璨滋 研究生 英文 Tsan-Tzu Yang 中文摘要 當遭受感染時，宿主免疫系統的嗜中性白血球 neutrophils 會在第一時間移行到受感染的部位清除病原菌並引起發炎反應。嗜中性白血球為生命週期 life span 很短的細胞，離開骨髓的嗜中性白血球會快速的分化至成熟且有功能的白血球。而活化後或老化的嗜中性白血球則會啟動自發性細胞凋亡 apoptosis 以維持血液循環中白血球的衡定 homeostasis 。在感染或發炎等情況下，則可能延長嗜中性白血球的生命週期，進而影響病菌清除、發炎及免疫反應的功能。一旦嗜中性白血球不受自發性凋亡的調控進而破壞了恆定機制，可能導致嗜中性白血球在血液循環中累積，臨床病理上定義為嗜中性球增多症 neutrophilia 。然而，在感染的模式中，如細菌內毒素脂多醣體 lipopolysaccharide 的刺激之下，導致嗜中性球增多症的分子機制仍不清楚。因此，我們假設脂多醣體透過抑制嗜中性白血球的自發性凋亡而導致嗜中性球增多症。首先，我們觀察到有別於野生型 wild type C3H/HeN小鼠，在Toll-like receptor TLR 4 gene Tlr4Lps-d 突變型C3H/HeJ小鼠對於脂多醣體所誘發的嗜中性球增多症有耐受性，說明了其中TLR4訊號存在的重要性。值得注意的是脂多醣體會抑制人類嗜中性球的自發性凋亡發生係透過阻止粒線體凋亡 mitochondrial apoptosis 、粒線體膜電位損失、myeloid cell leukemia sequence Mcl 1的降解及caspase-3的活化。在凋亡的嗜中性球中可觀察到肝醣合成酶激酶-3β glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β 的活化，而抑制GSK-3β便可避免Mcl-1的降解及粒線體凋亡。全反式視黃酸 All-trans retinoic acid 誘發HL-60細胞株分化的多核球發生GSK-3β依賴型細胞凋亡。脂多醣體透過活化phosphatidylinositol-3 kinase/AKT、p38 mitogen-activated protein kinase MAPK 及c-Jun N-terminal kinase JNK 等激酶而穩定Mcl-1，卻導致GSK-3β的去活化作用。在此也排除介白素-8 的產生直接參與脂多醣體促進的細胞存活中。然而，在in vitro 及in vivo都可證明脂多醣體刺激下產生的活性氧自由基 reactive oxygen species 也會調控p38 MAPK/JNK/AKT/GSK-3β/Mcl-1為主軸的訊息路徑、細胞凋亡及嗜中性球增多症。此外，脂多醣體誘發的嗜中性球增多症不會發生在p47phox缺失 Ncf-/- 的小鼠或給予抗氧化劑 antioxidant 處理的野生型小鼠。與健康的嗜中性球相比較下，伴隨有嗜中性球增多症之菌血症病患的嗜中性球會表現較多活化的AKT、p38 MAPK、JNK、去活化態的GSK-3β及穩定的Mcl-1。綜合以上結果顯示脂多醣在分子層面上直接與嗜中性球作用，透過引起氧活性分子生成來調控使GSK-3β去活化而抑制細胞凋亡，最後造成嗜中性球增多症。 英文摘要 While pathogens invade host, neutrophils immediately transmigrate to the sites of infection for microbial elimination as well as inflammatory activation. Neutrophilia, characterized by accumulative circulating neutrophils, is caused by the increased differentiation from bone marrow and/or by neutrophil survival from activation- as well as aging-induced cell death. Regulation of cell apoptosis