VE测定方法2.docVIP

1　主题内容与适用范围　　本标准规定了用高效液相色谱法测定食物中维生素A和维生素E。　　本标准适用于食物中维生素A和维生素E的测定。　　第一篇　高效液相色谱法　　2　原理　　样品中的维生素A及维生素E经皂化提取处理后，将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。用高效液相色谱法C18反相柱将维生素A和维生素E分离，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定。最小检出量分别为VA：0.8ng；α－E：91.8ng；γ－E：36.6ng；δ－E：20.6ng。　　3　试剂　　实验用水为蒸馏水。试剂不加说明为分析纯。　　3.1　无水乙醚：不含有过氧化物。　　3.1.1　过氧化物检查方法：用5mL乙醚加1mL 10%碘化钾溶液，振摇1min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉液，水层呈蓝色。该乙醚需处理后使用。　　3.1.2　去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放入纯铁丝或铁末少许。弃去10%初馏液和10%残馏液。　　3.2　无水乙醇：不得含有醛类物质。　　3.2.1　检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加入少量乙醇，摇匀，再加入10%氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。　　3.2.2　脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。将两者倾入1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(不时摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶