茶叶药理学.doc

1、阐述茶多酚对自适应反应转录因子Nrf2和脱毒酶的影响 茶激活自适应反应转录因子Nrf2 细胞遭遇氧化逆境，会产生自适应反应，启动一系列脱毒酶和抗氧化酶合成，对抗氧化逆境。①自适应反应的关键角色是转录因子Nrf2，在稳态时它被细胞膜上Keap1束缚住，无活性。②在氧化逆境时（点火，促氧化），Keap1上游离巯基形成二硫键，空间结构改变，不再束缚Nrf2，Nrf2进入细胞核启动转录。 如果基因中启动子区域含抗氧化反应元件 (ARE)，Nrf2可以与之结合，启动这些基因的转录。许多脱毒酶和抗氧化酶基因中含ARE，因此，这些酶因适度氧化逆境增加。 红色与绿茶均能激活Nrf2，这是它们预防疾病的重要机制。 2、EGCG在皮肤细胞中抗凋亡机制 EGCG在皮肤细胞的抗凋亡机制： EGCG诱导人皮肤细胞Bcl-2上升、Bax下降。EGCG激活皮肤细胞Erk和Akt，使Bad磷酸化。Bcl-2是抗凋亡因子，Bax和Bad是促凋亡因子。Bad与Bcl-2可形成二聚体，使Bcl-2失去活性，因此Bad促凋亡。磷酸化Bad不能与Bcl-2结合，不再促凋亡。 3、根据下图简要阐述EGCG保护神经细胞的机制。 EGCG预防阿尔茨海默病机制： 阿尔茨海默病是一种神经退行性疾病：认知能力下降、记忆减退，行为异常和障碍。病因为神经细胞沉积β淀粉样蛋白 (Aβ) 。 淀粉样前体蛋白 (APP) 经α和β两种分泌酶裂解β分泌酶产生沉积型、致病性Aβ，导致阿尔茨海默病。 EGCG进入细胞后能刺激PKC，PKC使α分泌酶增多，神经细胞中淀粉样前体蛋白经α分泌酶途径产生可溶性分泌型APP，所以随着α分泌酶增多，促进sAPPα形成，起到对神经细胞的保护作用。 4、根据下图判断MG-262和MG-132哪个是硼基蛋白酶抑制剂？依据是什么？ MG-262 should be。 EGCG能促进硼基蛋白酶的活性。EGCG消除硼基蛋白酶抑制剂的细胞毒性，EGCG不干扰非硼基蛋白酶抑制剂的细胞毒性。加入EGCG后，MG-262是当剂量达到一定值后才能使细胞死亡，MG-132细胞完全死亡。 5、EGCG抑制癌细胞生长是通过抗氧化作用还是促氧化作用？加入超氧化物歧化酶和过氧化氢酶对EGCG抑癌效应会产生什么影响？从活性氧来看，癌细胞与正常细胞对EGCG的响应有无区别？ （1）促氧化作用。 EGCG剂量依赖抑制肿瘤，高剂量效应强。高剂量EGCG导致肿瘤细胞氧化逆境，表现为8-OHdG、(-H2AX和caspase升高，因此可认为EGCG的抑癌作用机制为促氧化而不是抗氧化。 （2）降低抑癌效应。 超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）能降低EGCG抗癌作用。在细胞培养液中加入SOD和CAT，抑制EGCG的抑癌作用，这进一步说明促氧化机制行为。 （3）癌细胞与正常细胞对EGCG的相应有区别。因为EGCG对癌细胞作用时，会使细胞产生大量的活性氧而抑制癌细胞的生长，在正常细胞内则不产生。活性氧 (ROS)，一系列氧自由基的集合，包括超氧阴离子、单线态氧和羟自由基。不稳定、高活泼。 ①对比脑正常细胞和脑肿瘤细胞，EGCG在杀伤肿瘤细胞的剂量并不杀伤正常细胞。相对应的是EGCG在肿瘤细胞内产生ROS，在正常细胞则不产生。 ②对比血正常细胞PBMC和血肿瘤细胞，EGCG在杀伤肿瘤细胞的剂量并不杀伤正常细胞。相对应的是肿瘤细胞有67LR，而PBMC无67LR。关闭肿瘤细胞的67LR可阻止EGCG抑癌作用。 ③卵巢细胞转入致癌基因，植物化学物质处理癌变的卵巢细胞和未癌变的卵巢细胞，癌变的卵巢细胞ROS增幅大，植物化学物质选择性杀伤癌变的卵巢细胞。 6、举几例说明干预67LR可影响EGCG的生物活性。 （1）防癌：67LR抗体阻断EGCG的效应。当关闭67LR时，会使EGCG不再杀伤骨髓瘤细胞。 EGCG通道：层粘连蛋白受体 (67LR) 。层粘连蛋白受体 (LR) 是细胞表面跨膜糖蛋白，肿瘤细胞高表达。LR有十余种，包括67-kDa LR，简称67LR。表面等离子共振是分析生物分子相互作用的工具，利用表面等离子共振在乳腺癌细胞发现EGCG与细胞表面结合受67LR调控。67LR影响EGCG与细胞表面结合。EGCG防癌作用需67LR参与。关闭67LR基因导致EGCG不再杀伤骨髓瘤细胞。 （2）减肥：EGCG能阻断胰岛素对刺激前脂肪细胞有丝分裂的促进作用。而EGCG的这种效应通过67LR介导。 EGCG能抑制体重增长，减少脂肪积累，有减肥效应。已知较高浓度EGCG在癌细胞产生活性氧，而相对应组织的正常细胞耐受较高剂量EGCG，活性氧并不明显上升。脂肪组织包括前脂肪细胞和脂肪细胞。前脂肪细胞具有分化的潜能、使脂肪细胞数量增多，导致肥胖。考察EGCG对