泰山散瘀膏对小鼠腹腔巨噬细胞活化及吞噬红细胞功能的影响.docVIP

泰山散瘀膏对小鼠腹腔巨噬细胞活化及吞噬红细胞功能的影响 　　【摘 要】目的：研究泰山散瘀膏对小鼠活血化瘀作用及作用机制。方法：取32只小鼠，随机分为实验组和对照组各16只，实验组和对照组小鼠分别腹部贴覆涂有泰山散瘀膏和凡士林的透气薄膜，连续3天后通过腹腔注射抗凝鸡血至瘀血模型，利用瑞氏-吉姆萨染色法油镜下观察并计算红细胞、巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞的数量，探讨泰山散瘀膏活血化瘀的作用机制。结果：注射鸡血6 h后，实验组和对照组的吞噬红细胞的巨噬细胞数分别为（178.22±40.78）和（201.12±34.56，12） h后实验组和对照组的吞噬红细胞的巨噬细胞数分别为（30.29±9.99）和（48.12±12.28），两组比较差异均有统计学意义（P0.05）。结论：泰山散瘀膏通过明显促进巨噬细胞活化及吞噬红细胞的功能而起到活血化瘀的作用。 　　【关键词】 巨噬细胞；瘀血；泰山散瘀膏 　　急性软组织损伤是临床常见的外伤，外来暴力、扭伤等均产生不同程度的损伤，严重者可影响工作和生活。其处理方法较多，局部外用药可以帮助缓解症状，促进损伤恢复。泰山散瘀膏是山东省泰安市中医医院制剂，在临床应用20余年，疗效显著。笔者通过实验对泰山散瘀膏的活血祛瘀作用机制进行初步研究，现将研究结果总结报告如下。 　　1 材料与仪器 　　1.1 实验动物 成年SPF级小鼠，体重（25±5） g，雌雄不限，购自山东省泰邦生物制品有限公司。 　　1.2 实验仪器 MIUI-Q超纯水系统，购自法国MilliPore公司；JGL-16G型离心机，购自上海安亭科学仪器厂。 　　1.3 药物与试剂 泰山散瘀膏主要由大黄、木香、川牛膝、玄参、羌活、当归、赤芍、三棱、莪术、延胡、南星、紫草、桃仁、枳实、青皮、花椒、降香、松节、透骨草、伸筋草、荆芥、薄荷、紫花地丁、制川乌、苏木、水蛭、乌梢蛇、制草乌、海桐皮、木瓜、土鳖虫、地龙、三七、红花等药物组成，由泰安市中医医院制剂科制；凡士林、吉姆萨染剂等为国产分析纯，购自天津市永大化学试剂有限公司。 　　2 方 法 　　2.1 实验方法 将泰山散瘀膏均匀涂到透气薄膜上，剪成1 cm2大小的片状，4 ℃冰箱内保存备用。取32只小鼠，随机分为实验组和对照组，每组16只。取实验组小鼠，将小鼠腹部去毛并局部贴覆涂有泰山散瘀膏的透气薄膜1 cm2，四角缝在小鼠腹部，每天换药1次，连续3天。以透气薄膜在小鼠腹部停留2 h以上为用药时间合格，停留时间不足2 h者重新换药。末次给药后30 min，腹腔注射浓度1 %的抗凝鸡血0.3 ml，分别于注射鸡血后6 h、12 h各处死8只小鼠抽取腹腔液，作涂片，瑞氏-吉姆萨染色，镜下观察，计数红细胞、巨噬细胞及巨噬红细胞的巨噬细胞数量。对照组除透气膜上涂凡士林外，其余操作与实验组相同，所得数据统计学处理。 　　2.2 统计学方法 采用SPSS12.0统计分析软件处理数据。计量数据以表示，两组间比较用t检验。P0.05为组间比较差异有统计学意义。 　　3 结 果 　　注射鸡血6 h后观察结果。油镜下观察腹腔液涂片，可见对照组与实验组片中均有大量红细胞及巨噬细胞，多数红细胞呈游离状态，部分巨噬细胞呈球形，胞质内未见吞噬的红细胞，亦可见大量吞噬红细胞的巨噬细胞，其中实验组吞噬红细胞的巨噬细胞数量明显多于对照组。用测微尺计数1 mm2内的游离红细胞、未吞噬红细胞的巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞数，统计学处理数据，实验组吞噬红细胞的巨噬细胞明显多于对照组，差异有显著的统计学意义（P0.05）。见表1、图1。 　　注射鸡血12 h后观察结果油镜下观察腹腔液涂片，可见实验组与对照组中游离红细胞基本消失，被巨噬细胞吞噬的红细胞比例明显增多。计数1 mm2内的游离红细胞、未吞噬红细胞的巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞数，实验组未吞噬红细胞的巨噬细胞及吞噬红细胞的巨噬细胞数明显多于对照组，差异有显著的统计学意义（P0.05）。见表2、图2。 　　4 讨 论 　　急性软组织损伤属于中医学“伤筋”范畴，是局部气血经络损伤后的病理反应。现代医学认为，急性软组织损伤的原因主要有两方面：一方面是外力直接造成局部组织细胞微观结构损伤和微小血管破裂、出血，以及组织细胞充血水肿和变性坏死致受损局部肿胀、疼痛；另一方面是损伤后局部组织细胞释放出炎性介质、代谢产物聚集造成内环境改变，引起损伤细胞代谢障碍，从而加重局部症状和体征以及病理变化[1]。 　　祖国传统医学认为急性“伤筋”后，脉络破损，血离经脉而成瘀，瘀血不散，气血流行不通，不通则痛，气滞血瘀，筋脉阻滞是筋伤的病机，活血化瘀为治疗该病的大法[2]。 　　现代科学实验也证实了活血化瘀、消肿止痛中药起两方面的作用：①对损伤早期出现肿胀疼痛，活血化瘀