第13章 蛋白质合成.pptVIP

Genetic information－DNA and Central dogma (Replication, Transcription and Translation) pr的生物合成需要信息、能量、物质： ◆ mRNA, rRNA and tRNA ◆ Energy－ATP, GTP ◆ Material－Aa （Activated RNAAa） ◆ Cofactors－E、Protein factors、Metal ions Genetic code [遗传密码]: 指DNA分子中特定的Nt Sequence指定特定的Aa Sequence ，这种相关关系或“翻译语言”称为… Codon[密码子]: 每3个Nt 顺序指令一个Aa的排列位置，这3个相邻的Nt 称“三联体[Triplet]”或“密码子”。 一、Evidence of Genetic code 1、Mathematics Evidence 50年代，人们已经知道pr的Aa顺序与Nt顺序有关，但Nt 4种，Aa 20种，4种 Nt 怎样编排才能有效地指导Aa顺序呢？人们首先在数学上加以推导（择要介绍） 1个Nt决定1个Aa， 41 = 4 不能满足指导20Aa的需要 2个 42＝16 仍不能 3个 43＝64 最可能 4个 44＝256 太多 2、Biochemical Evidence 1）Poly U（人工mRNA），20种Aa，在E.Coli－无细胞系中保温，获得Single Phe Peptide（Phe 密码为UUU） Poly A做模板时，获得单一Lys肽链（Lys密码为AAA） Poly C 做模板时，获得单一Pro肽链（Pro密码为CCC） 四联体 UGUG UGUG UGUG…or GUGU GUGU… 为模板获得单一Aa链（UGU为CySH、GUG为Val）结果：N－CySH-Val-CySH-Val-CySH-Val－C。证明确以三联体密码(Triplet condon)形式存在。 同样方法证明了其它Aa的三联体密码。 2）E.Coli Ribosome +Templet of Chemical Synthesis (人工模板) + 相应Aa-tRNA+Mg2+保温。 a. Do not add GTP Add GTP b. 模板改为5′PGUUGUU-OH 3′ Val结合于模板 c. 模板改为5′PGUU-OH 3′ Val结合于模板 d. 模板改为5′P-GU-OH 3′无Val结合于模板（至少需要三Nt） f. 模板改为5′-OH-GUU-P-3′无Val结合于模板 说明：只有5′P才具模板功能，即翻译有方向性 5′? 3′；需GTP 根据以上大量实验，65年编遗传密码字典。其中AUG 为起始信号，UAA，UAG，UGA为终止Codon 二、Characteristics of Genetic Code 1、Commaless(无标点) From AUG→???? to UAA，一个接一个阅读，其间无 Nt 隔开。插入或删去一个Nt， 即造成移码突变，如： …UGU GUG UGU GUG… Cys Val Cys Val …UGU GGU GUG UGU… Cys Gly Val Cys 2、Currency(通用性,近乎） Virus、Procaryote、Eucaryote…都用同一套Genetic Code，如用兔红血球核糖体（含mRNA）与E.Coli tRNA 及pr合成其它因子保温，合成了兔Hb，说明E.Coli tRNA能正确阅读兔Hb的mRNA上的信息。 但同一Aa的几组Codons，不同生物利用频率不同 3、 Degeneracy（简并性） 大多数Aa, 除Met, Trp外，都可具有好几组Codon， （64：20）。如UGU，UGC皆为Cys，几种密码子编码同一Aa的Codon叫简并Codon(同义密码子) 4、第三碱基的变偶性（Wobble）（第三碱基具较低专一性） Codon的专一性主要由头两个N决定，第三碱基不那么重要，这一性质称Codon的变