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实验诊断实习报告 宁夏医学院临床学院 诊断学教研室 实验诊断实习指导前言 实验诊断是诊断学的重要组成部分，即通过临床实验技术对患者诊断（） 血常规检查 目的：1 2、掌握血细胞计数板的使用。 3、掌握显微镜红细胞计数的方法。 一、血红蛋白测定（） （）：SHb（）（Hi）（CNHicN,（HicN）nm，液层厚度lcm的条件下具有一定的毫摩尔消光系数。用分光光度计直接比色测定，据标本的吸光度即可求出血红蛋白浓度。 （）：HcN转化液（） 200mg 氰化钾 50mg 无水磷酸二氢钾 140mg TXitonX～l00 l.0ml 蒸馏水加至 1000mI 此液过滤后为淡黄色透明液体，PH7.0~7.4 放置在有色试剂瓶中加盖，冷暗处保存，可稳定数月。 （） 1、20ul血液+5.0ml转化液,混匀，静置5分钟 2、721分光光度计，540nm，光径（10mm）（A） 3： （）Hb（gL）A/44×64458/1000×251＝A×367.7 A：540处标本吸光度 64458（mg）：Hb的毫克分子量，即lmmol/L Hb溶液中的Hb毫克数。 1000：为将mg转变为g 251： （2）HicN 用HicN标准液倍比稀释（50100g/L，150g/L，200g/L）540nm处分别测定各稀释度的吸光度（0.13、0.27、0.405、0.54）K K=ΣHb/ΣA=371.75 Hb=K×A （）： Hb （）120～160g/L 成年女性110～150g/L 新生儿：170200g/L 二、红细胞计数 （）；（）（Neubauer计数板）H”型凹槽分为两个同样的计数池。计数池两侧各有一条支持堤，比计数池平面高出0.l0mm，将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成高0.lmm的计数池，计数池长、宽各3.00mm，平均分为9个大格，每个大格面积为1.0mm2，容积为0.1mm3（ul） 9个大格中，中央大方格用双线分成25个中方格，其中位于正中及四角的这五个中方格是红细胞和血小板计数区。每个中方格又用单线分为16个小方格，便于计数。位于四角的四个大方格是白细胞计数区，它们分别用单线划分为16个中方格，便于计数。计数原则：（）：（）1.0g 硫酸钠5.0g（2.5g）0.5g 蒸馏水加至200ml，过滤备用 （）： 2m1，置管中。 2、用微量吸管吸取末稍血10u1，擦去管尖外面多余的血液，迅速将管内血液加入试管稀释液中，并用稀释液洗净管内残余血液，立即充分混匀，倾斜，用玻璃棒沾取红细胞悬液，充入血细胞计数池，注意量要适宜，要求一次充好，不产生气泡，充入后静置2～3分钟，使红细胞下沉。 3、将血细胞计数板置于显微镜下，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀，即可进行计数，计数中央大方格中的四个角上和中心的中方格（5个中方格）（）： 5个中方格所得红细胞的总和乘以10.000即为每mm3血液内的红细胞数，再将其换算成每升血液中的红细胞数： 计算公式为：R（）5（0.1立方毫米）l0（）200（） R×l0.000/mm3＝R×l0.000×I06/L 1L=106uL （）： XX×1012/L （）：（4.05.5） 女性（35～5.0） 新生儿（60～7.0） 附 网织红细胞 网织红细胞是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间不完全成熟的红细胞，经煌焦油蓝活体染色，胞质内出现深染颗粒，可联缀成线网状，故称为网织红细胞，通常计数1000个红细胞后求其检出率（） 参考值：1.评价骨髓造血功能。 2.增高见于溶贫。 3.降低见于再生障碍性贫血。 4.观察疗效。 实验二 白细胞计数、分类、血沉（）1、掌握白细胞显微镜计数的原理及操作方法。 2、掌握血膜片的制备和瑞氏染色 一、白细胞计数 （一）原理：2﹪冰乙酸加结晶紫数滴 （三）方法：：0.38ml于试管中。 2、加血：用微量吸管取血20uL加入白细胞稀释液中，并用其上清液清洗管内残余液2~3次。 3、溶血： 4、充池：2~3分钟，待细胞下沉后显微镜计数。 5、计数：4个大方格的白细胞总数计算： WBC=四个大方格内白细胞数/4×10×20×106/L （五）参考值：4.0～10.0×109/L 新生儿：15.0～20.0×109/L 婴儿：11.0～12.0×109/L （六）报告方式：WBC 白细胞按形态分为粒细胞、淋巴细胞、单核/细胞，在瑞氏染色（wri）： ①中性粒细胞：10～132～550～