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脑脊液检验 脑脊液检验 脑脊液 cerebrospinal,CSF 是存在于脑室及蛛网膜下腔中的无色透明液体。 正常成年人CSF总量为120~180ml,平均150ml。 CSF的主要功能:①保护脑和脊髓免受外力震荡损伤;②调节颅内压力;③提供中枢神经系统营养物质并运出其代谢产物;④保持中枢神经系统pH在7.31-7.34;⑤通过转运生物胺类物质,参与神经内分泌调节。 标本采集 适应症 1 有脑膜刺激症状时,如脑膜感染性疾病。 2 疑有颅内出血,如蛛网膜下腔出血。 3 中枢神经系统肿瘤。 4 不明原因的剧烈头痛﹑昏迷﹑抽搐或瘫痪。 5 中枢神经系统疾病需椎管内给药治疗及手术前麻醉﹑造影等。 标本采集 腰椎穿刺采集,特殊情况下可由小脑延髓池或侧脑室穿刺获取。 穿刺成功后先作压力测定,正常人80-180mmH2O,>200mmH2O表示颅压增高,此时放出CSF的量应控制在2ml以内。 测定压力后将CSF收集于3支无菌试管中,每管1~2ml。第1管作细菌培养,第2管作化学检查和免疫学检查,第3管作理学及显微镜检查,如疑有恶性肿瘤,取第4管作脱落细胞学检查。 立即送检 放置过久,细胞破坏或细胞包裹于纤维蛋白凝块中导致细胞数降低及分类不准; 葡萄糖分解,使葡萄糖测定结果降低; 细菌自溶或死亡,影响细菌检出率。 脑脊液常规检查 内容包括:颜色、性状、潘氏试验、细胞计数(指白细胞计数) 、细胞分类(指白细胞分类)。 1 颜色 正常情况下,脑脊液呈无色。病理情况下可有不同的颜色改变。 ① 红色 常见于穿刺损伤或出血性病变。 穿刺损伤引起的出血,第1管为红色血性,第2﹑3管红色逐渐变淡,红细胞计数依次减少,离心沉淀后上清液透明。 颅内或椎管内新鲜出血,3管均呈红色,红细胞计数无明显差别,离心沉淀后上清液呈淡红色或黄色。 由于红细胞在某些脑脊液中5分钟后即可出现皱缩现象,因此不能根据红细胞是否皱缩鉴别陈旧性或新鲜出血。 ② 黄色 常见于陈旧性蛛网膜下腔或脑室出血﹑椎管梗阻﹑化脓性脑膜炎﹑结核性脑膜炎﹑重症黄疸如核黄疸。 ③ 白色或灰白色 常见于化脓性脑膜炎,多由于白细胞增加所致。 ④ 褐色或黑色 见于脑膜黑色素瘤。 2 性状(透明度) CSF透明度可用“清晰”﹑”透明” ﹑”微浊” ﹑”微浑” ﹑”混浊”描述。正常情况下, CSF是“清晰”﹑”透明”。 CSF混浊主要由于感染或出血导致CSF中细胞成分增多所致,混浊程度与细胞数量有关,>300×106/L时,可出现混浊。 蛋白质含量增加或含有大量微生物也可产生混浊。 病毒性脑膜炎﹑神经梅毒CSF可透明;结核性脑膜炎CSF常呈毛玻璃样轻度混浊;化脓性脑膜炎CSF呈明显混浊。 3 凝固性 CSF可用“无凝块” ﹑”有凝块“﹑”有薄膜“﹑”胶胨状“描述。 正常情况下CSF标本静置12-24h不形成薄膜﹑凝块或沉淀物。 在炎症情况下,CSF中蛋白质(包括纤维蛋白原)含量增高,>10g/L时可形成凝块。 化脓性脑膜炎CSF静置1-2h,可形成凝块或沉淀物;结核性脑膜炎CSF静置12-24h,标本表面有网膜形成,取该网膜作结核杆菌检查,阳性率较高;蛛网膜下腔梗阻时,蛋白质含量可达15g/L,呈黄色胶胨状。 4 潘氏试验(Pandy test 潘氏试验是蛋白质定性试验。 正常CSF蛋白质含量不到血浆蛋白的1%,主要为清蛋白。 中枢神经系统发生病变时,蛋白质含量可有不同程度的增高。CSF中蛋白质含量检测有助于对神经系统疾病的诊断。 潘氏试验(Pandy test 原理 :CSF中蛋白质与苯酚结合成不溶性的蛋白盐而生成白色沉淀。 操作:取潘氏试剂2ml,置于试管中,用吸管滴入1-2滴CSF,在黑色背景下立即观察结果。 结果判定标准 (1) 不形成沉淀,判定为阴性(-); (2) 轻微的白色云雾状,判定为弱阳性(±); (3)灰白色云雾状,判定为1+; (4)白色混浊,判定为2+; (5)白色絮状沉淀,判定为3+; (6)白色块状沉淀,判定为4+。 方法学评价 潘氏试验所需CSF标本量少,检测灵敏度高,结果易于观察,沉淀物的多少与标本中蛋白质含量成正比。 但由于灵敏度高,部分正常CSF可出现弱阳性。 5 显微镜检查 (1) 细胞计数 日常工作中白细胞计数。在标本采集后1h内进行。 操作:通常采用手工法,改良牛鲍计数板计数。在试管中加入1滴冰醋酸,转动试管,使内壁沾有冰醋酸后倾去,然后滴加混匀的脑脊液3-4滴,数分钟后,混匀充入计数池。 计数板:9个大方格,每个大方格容积0.1 μl,计数10个大方格,结果×106/L。 如标本中细胞数过多,可用生理盐水或红细胞稀释液将标本稀释后再计数(注意:结果必须乘以稀释倍数),也可以用血细胞分析仪
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