实验中发现,随着底物的酶解,部分纤维素酶回到溶液中,以自由酶形式存在。因此,我们设计了新鲜底物重吸附工艺,具体流程如图,即在酶解水解液中加入新鲜底物重吸附溶液中的自由酶,用于下一轮的水解。实验中添加了非离子表面活性剂吐温80,影响底物和酶的相互作用,降低木质素对酶的吸附,使更多酶游离于溶液中。利用该工艺可回收内切和外切纤维素酶,连续操作3次可使纤维素酶利用率提高一倍以上。该方法工艺和设备简单,适于工业化生产。对该工艺,我们进行了单因素实验和响应面优化,得出了底物浓度、加酶量、吐温80加入量等参数值,在最优条件下酶回收率可达85.7%。 * 设计并构建了以“微滤-超滤-纳滤”为主体的多级膜分离设备。这是30L多级膜分离装置图。 * 与国际进展比较,我们在最终底物浓度和酶解提高率上均较高。 * 这是发酵制醇部分研究的框架图,主要从发酵微生物和纤维素水解液发酵优化两个方面展开。其中微生物的研究主要围绕微生物的耐受性展开,包括抑制剂耐受性和乙醇的耐受性;水解液发酵的优化主要是优化发酵相关参数,并进行了全流程的物料衡算。 这是当前国际上主要的单一抑制剂耐受菌株和本项目的菌株的耐受情况列表。 乙醇作为发酵的终产物,对发酵微生物有非常大的毒害作用。提高乙醇耐受对于降低纤维素乙醇的生产成本有重要影响。这是当前国际上主要的乙醇耐受菌株和本项目得到的耐受菌株情况列表。 以1000g稻草秸秆为底
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