15王鹏飞中期汇报概念.ppt

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3-COOH C-3 C-2,C-4 2,4-COOH 化合物 6 与化合物 3柠檬酸甲酯谱图比较,化合物6缺少一个甲氧基信号(δ 51.9),因此推断其为柠檬酸。 OH-6 -NH OH-2 H-2 H-8 H-9 H-10 C-3 C-7 C-3a C-5 C-6 C-9,CH C-8,CH C-7a C-2,CH C-10,CH3 化合物 7 通过分析化合物7的谱图数据,其与文献报道的pyranonigrins-A (PG-A)一致。 目前工作进度 开始对乙酸乙酯相进行分离; 正在对菌种进行ITS序列测定; 已投出文章一篇(正在审理中)。 后续工作安排 继续对代谢产物进行分离纯化; 完成菌种的鉴定; 在上述基础上完成第二篇文章。 黑果枸杞内生真菌RER 4次生代谢产物研究 汇报人:王鹏飞 学号:1108078 指导老师:马养民 教授 引入一 黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.) 生长于我国西北盐碱地区,名贵藏药,具有较高药用价值。 引入二 内生真菌(Endophytic fungi) Strobel 等指出内生真菌是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部的真菌。 特点 内生真菌往往能够产生和宿主植物相同或者相似的代谢产物,且易于大量培养。 引入三 次生代谢产物(Secondary metabolites) 次生代谢产物是指次生代谢(Secondary metablism)产生的一类细胞生命活动或植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物,其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。 主要内容 选题依据 高盐分离 内生真菌RER4分离自黑果枸杞根部,采用NaCl浓度为5%PDA培养基分离出。有文献报道称,高盐浓度可刺激真菌产生特殊的代谢产物。 曲霉属 曲霉属真菌具有多样的次生代谢产物,这些代谢产物大多数具有较强的活性。 选题依据 抑菌活性 菌种 苹果树腐烂菌 尖孢根腐菌 辣椒瘟霉菌 蕃茄灰霉菌 小麦赤霉菌 葡萄炭疽 西瓜枯萎菌 烟草镰刀菌 青霉菌 RER 4 +++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ + +++ 菌种 乳链球菌 大肠杆菌 枯草杆菌 绿脓杆菌 白色念珠菌 金黄色葡萄球菌 RER 4 +++ +++ +++ +++ ++++ ++++ 采用滤纸片法对其抑菌活性进行检测 该菌株对植物病原真菌及细菌生长具有广泛的抑制作用 研究目的及意义 药用植物 逆境植物 内生真菌 新结构化合物 高活性化合物 代谢产物提取 无机盐溶液(不含蔗糖的察氏培养基+5 %NaCl):大米=1.2:1 含石油醚、乙酸乙酯、丙酮等回收混合溶剂 代谢产物分离 P:石油醚;E:乙酸乙酯;M:甲醇,比例为体积比 化合物 1 和文献对比,确定化合物1为麦角甾醇 -OH H-6 -CH2 H-7 H-4 C-2 C-8 C-5 C-9 C-6 C-4 C-7 C-3 化合物2 和文献对比,化合物2鉴定为尿黑酸内酯 -CH2 -COOH -OH -OCH3 -COOH -COOCH3 -OCH3 -CH2 化合物 3 经过氢谱和碳谱分析,化合物3和文献报道的-柠檬酸甲酯一致 -COOH H-2 H-4 CH2 -OH C-5 -COOH C-3 C-2 C-4 -CH2OH 计算值: 141.01878 (C6H5O4) 检测值:141.0188 推测为M-H+ 化合物 4 结合高分辨质谱,化合物的谱图数据与报道的 5-(hydroxymethyl)furan-3-carboxylic acid一致 J=9.3,d,H-5 J=2.8,d,H-6 J=9.3,J=2.8,dd,H-4 OH-2 OH-3 -OCH3 -CH2 C-1 -CH2 C-5 C-6 C-4 C-2 C-3 -COO -OCH3 计算值:181.0501(C9H9O) 检测值:181.0493 推测其为 M-H+ 化合物 5 通过氢谱和碳谱数据,并 结合高分辨质谱分析,化合物5为2,3-二羟基乙酸甲酯 H-2,H-4 -COOH -OH

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