广东工业大学-生物化学-第十七章RNA生物合成100613描述.pptVIP

第十七章 RNA的生物合成（转录） 转录 生物体以DNA的一条链为模板，以NTP为原料合成RNA的过程 第三节转录机制P405 分为三个阶段： 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination) 一、原核生物的转录过程 （一）转录起始 转录起始过程 （二）转录延长 电镜下原核生物 转录现象： 转录未完成， 翻译已开始进行。 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 二、真核生物的转录过程 真核生物的转录起始是在转录因子的 协助下，RNA聚合酶辨认结合转录起 始点上游的DNA序列 (启动子)，生成 起始复合物。 转录以在DNA的一条链为模板，另一条链为编码链（不转录），这样模板链不总在同一条链上，这种转录方式称为不对称转录 DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链，也称作有意义链或Watson链。相对的另一股单链是编码链，也称为反义链或Crick链 第五节 转录后加工 （P412） 帽子结构 5? pppGp… 5? GpppGp… pppG ppi 鸟苷酸转移酶 5? m7GpppGp… 甲基化酶 帽子结构的生成 5? ppGp… 磷酸酶 Pi （二）mRNA的剪接 1. hnRNA 和 snRNA 核内的初级mRNA称为杂化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) snRNA snRNA (small nuclear RNA) 小分子核仁RNA 核内的蛋白质 小分子核糖核蛋白体 （snRNP）RNA剪接场所 snRNA 4. mRNA的剪接 —— 除去hnRNA中的内含子，将外显子连接。 snRNP与hnRNA结合成为剪接体 ① 真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) C A B D 编码区 A、B、C、D 非编码区 2. 外显子(exon)和内含子(intron) (P412) 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列 内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA 三、rRNA的转录后加工 （P420） 转录 剪接 18S - rRNA 5.8S和28S-rRNA rDNA 内含子 内含子 28S 5.8S 18S 45S - rRNA * * 转录 RNA DNA 第一节 导言 (P401) 模 板 原 料 酶 产 物 配 对 方 向 引 物 DNA(不对称转录） NTP RNA聚合酶 tRNA,rRNA, mRNA,snRNA,hnRNA A-U,T-A,G-C 5’ 3’ 不需要 ◆以DNA为模板； ◆都以四种三磷酸核苷为底物（原料）； ◆都遵循DNA与RNA之间的碱基配对； ◆ RNA链的延长方向是5’→3’的连续合成； ◆需要Mg2+或Mn2+离子； ◆并不需要引物； 一. 依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP） (一) RNA聚合酶的特点： 第二节 参与RNA合成的酶 （一）原核生物的RNA聚合酶 核心酶 全酶 ?? ? ? ? ? ?? ? ? ? 转录起始 转录延长阶段σ亚基脱落 ◆按其对α-鹅膏蕈碱敏感性而分为三种； ◆均由10～12个大小不同的亚基所组成，结构非常复杂，其功能也不同。 (三) 真核生物RNA聚合酶 类型 ◆ Ⅰ ◆ Ⅱ ◆ Ⅲ 转录产物 rRNA:18s,5.8s,28s hnRNA, snRNA tRNA ,5srRNA 对鹅膏蕈碱 的反应 不敏感 高度敏感 中度敏感 定 位 核 仁 核基质 核基质 1. RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合-35区，酶移向－10区，跨入转录起始点 2. DNA双链解开，20bp以下，通常是（17±1）bp 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物（ 5