1-3酶分离纯化-2描述.ppt

第五节 酶的分离纯化 一 细胞破碎 二 酶的提取 三 离心分离 四 过滤与膜分离 五 沉淀分离 六 层析分离(link) 七 电泳分离(link) 八 萃取分离 (link) 九 酶的结晶(link) 十 浓缩与干燥(link) 六 层析分离 是利用混合物中各组分的物理化学性质（分子大小和形状、分子极性、吸附力、分子亲和力和分配系数等）的不同，使各组分在两相中的分布程度不同而达到分离。 层析分离中一个相是固定的,称为固定相; 另一个相是流动的,称为流动相; 各组分移动速度步同,使不同组分分纯化; 层析分离设备简单,操作容易; 表4-5 层析分离方法 一、吸附层析(link) 二、分配层析(link) 三、离子交换层析(link) 四、凝胶层析(link) 五、亲和层析(link) 附：视频动画 1、色谱柱 2、液相色谱 一、吸附层析 一个相中的物质在两相界面上密集现象称为吸附； 吸附产生原因：固体表面分子与固体内部分子受的作用力不同；主要是范德华力。 常用于酶分离纯化的：硅藻土、氯化铝、磷酸钙、羟基磷灰石、活性碳。 不同物质吸附力、解析力不同，移动距离不同，而分离。 ２、洗脱方法 （１）溶剂洗脱法 吸附层析（续） （３）前缘洗脱法 ３、吸附剂与洗脱剂的选择 （１）吸附剂的选择 极性物易被极性表面吸附；溶解度大的越难吸附；吸