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要点三 常用的载体——质粒 1.来源:质粒主要存在于细菌、酵母菌等生物中。 2.结构:是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并且具有自我复制能力的双链环状DNA分子, 如下图所示: 3.标记基因:质粒上有一些特殊的基因,如抗四环素基因、抗氨苄青霉素基因,用于对重组DNA进行鉴定和选择。 4.载体的作用 (1)用它作为运载工具,将目的基因送入受体细胞中去。 (2)利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。 特别提醒 (1)主动运输中载体的化学本质是蛋白质,其作用是运输离子、氨基酸、核苷酸等物质进出细胞。 (2)基因工程中的载体的化学本质是DNA,其作用是携带目的基因进入受体细胞。 (2012·长沙一中高二质检)如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图,据图回答下列问题。 例3 (1)a代表的物质和质粒的化学本质相同,都是________,二者还具有其他共同点,如①________________________________________________________________________, ②______________________________________ __________________________________(写出两条即可)。 (2)若质粒DNA分子的切割末端为—A,—TGCGC),则与之连接的目的基因切割末端应为________;可使用________把质粒和目的基因连接在一起。 (3)氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为________,其作用是_____________________ ______________________________________________________________________________。 (4)下列常在基因工程中作为载体的是( ) A.苏云金芽孢杆菌抗虫基因 B.土壤农杆菌环状RNA分子 C.大肠杆菌的质粒 D.动物细胞的染色体 【解析】 质粒是基因工程中最常用的载体,是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子,具有一至多个限制酶切割位点,进入受体细胞后能自主复制,具有标记基因便于重组DNA的鉴定与选择。 【答案】 (1)DNA 能够自我复制 具有遗传效应 (2) (3)标记基因 供重组DNA的鉴定和选择 (4)C 变式训练 质粒是常用的基因工程载体。如图是某种天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(标示了部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析下列说法正确的是( ) A.图中的终止子是由三个相邻碱基组成的终止密码 B.用农杆菌转化法可将该质粒构建的表达载体导入动物细胞 C.用限制酶Ⅰ和DNA连接酶改造后的质粒无法被限制酶Ⅱ切割 D.用限制酶Ⅱ处理能防止该质粒构建的表达载体引起植物疯长 解析:选D。密码子是mRNA上三个相邻的碱基,不会出现在DNA上;农杆菌转化法是将重组载体导入植物细胞;用限制酶Ⅰ和DNA连接酶构建的表达载体中存在限制酶Ⅱ的识别位点;用限制酶Ⅱ切割后,编码控制细胞分裂素合成的物质就不能合成了。 栏目导引 新知初探思维启动 要点突破讲练互动 知能演练轻巧夺冠 专题1 基因工程 专题1 基因工程 专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 学习导航 1.了解限制酶及DNA连接酶的来源。 2.掌握限制酶及DNA连接酶的作用。 [难点] 3.理解载体需具备的条件。 [重点] 新知初探思维启动 一、基因工程 基因工程的别名 __________________ 操作环境 生物体外 操作对象 _________ 操作水平 _________________ 结果 _______________________ DNA重组技术 基因 DNA分子水平 新的生物类型和生物产品 想一想 1.从结构上分析,为什么不同生物的DNA能够重组? 【提示】 (1)基本单位相同。(2)空间结构相同。 二、限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 1.来源:主要来自于___________。 2.特点 (1)识别双链DNA分子的某种___________序列; (2)使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的_____________断开。 原核生物 特定核苷酸 磷酸二酯键 3.作用结果 (1)黏性末端:在所识别序列的_____________将DNA的两条链分别切开时形成的末端。 (2)平末端:在所识别序列的_________处切开时形成的末端。 中心轴线两侧 中心轴线 想一想 2.限制性核酸内切酶的作用特点体现了酶的哪种特性? 【提示】 限制性核酸内切酶只能识别特定的核苷酸序列,并且只能在特定部位切割,这说明了酶具有专一性。 三、DNA连接酶—
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