脑膜炎细菌研讨.ppt

山东省立医院 流行性脑脊髓膜炎及细菌性脑脊髓膜炎实验室病原学检测方法 山东省立医院检验科 李平 病理学基础 细菌性脑膜炎常见病原 脑膜炎奈瑟菌 流感嗜血杆菌 肺炎链球菌 葡萄球菌 大肠杆菌 猪链球菌 隐球菌 B组链球菌 结核杆菌 单增李斯特菌 … 细菌检测技术 脑膜炎奈瑟菌 奈瑟菌属（Neisseria）属于β-变形菌类，为革兰氏阴性菌。 脑膜炎奈瑟菌（Neisseria meningitidis） 乳糖奈瑟菌（Neisseria lactamica） 粘液奈瑟菌（Neissetia mucosa） 深黄色奈瑟菌（Neisseria perflava） 咽奈瑟菌（Neisseria pharyngis） 多糖奈瑟菌（Neisseria polysaccharea） 干燥奈瑟菌（Neisseria sicca） 微黄色奈瑟菌（Neisseria subflava） 淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeae） 脑膜炎奈瑟菌镜下是革兰阴性双球菌，成卵圆形和肾形，0.8μm×0.6μm常成对排列 奈瑟菌属部分菌种生化特征 流感嗜血杆菌 病原学：流感嗜血杆菌简称流感杆菌，属孤菌科嗜血杆菌属。 形态呈无色透明（或灰白色），圆形、光滑，边缘整齐，露滴状，且散出鼠穴的气味菌落，有荚膜菌株的菌落呈轻度粘稠。有荚膜菌株形成光滑的菌落，并且该菌落比同样过夜培养的无荚膜的菌落大 流感嗜血杆菌镜下形态 流感嗜血杆菌是一大群无动力、无芽胞和鞭毛、呈球杆状、杆状或长丝状等多形性的革兰阴性杆菌，两端钝圆，长0.3μm～1.5μm，宽为0.3μm-0.4μm在无CO2环境中培养则菌落较小。 B-H培养基鉴定（ X＋V 因子鉴定） 0.5麦氏单位悬浮液； 脑心浸液（B-H）琼脂平板上； V因子，X因子，X＋V因子 嗜血杆菌属（Haemophilus） 流感嗜血杆菌VX因子生长状态 流感嗜血杆菌API生化结果 乳胶凝集试验 链球菌 链球菌分类 甲型溶血性链球菌：称甲型溶血或?溶血，?溶血环中的红细胞并未完全溶解。多为条件致病菌。 乙型溶血性链球菌：称乙型溶血或?溶血，?溶血环中的红细胞完全溶解，致病力强 丙型链球菌：无溶血环，一般不致病 链球菌 链球菌分类 兰氏分类：按多糖类抗原（C抗原）将链球菌分成A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S和T群(其中缺I、J群) ，近年又增加U、V群，共20群，每个群有1个或多个种。 其中引起人类感染的90%链球菌属于A群，而A群链球菌大部分是乙型溶血性链球菌。 链球菌 肺炎链球菌在血琼脂培养基上可形成细小、灰色、有光泽的扁平菌落，菌落周围有草绿色α溶血环。 猪链球菌形成直径l～2毫米的细小菌落，灰白色，半透明，边缘整齐，凸起，光滑，α溶血（有时呈弱β溶血或溶血不明显），48小时后可有草绿色色素沉着。 链球菌镜下特征 肺炎链球菌呈矛头状，成双排列，故又名肺炎双球菌 ，革兰染色阳性 链球菌镜下特征 刚分离的猪链球菌，典型的革兰氏阳性链球菌，链长达二十多个 链球菌生化特征 链球菌生化特性往往差异较大，一般难以作为分类依据 梅里埃API生化鉴定系统API 20 strep可鉴定 奥普托欣敏感性试验 如果一个α溶血菌株分离物晕轮大于14mm时，即为肺炎链球菌；分离物晕轮介于12mm与14mm之间，还应该进行胆汁溶解试验进一步确认。 胆汁溶解试验 肺炎链球菌35～37℃培养2小时后，所有的混浊都消失，细胞溶解。相反，质控管仍然混浊 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 (Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），可引起多种严重感染。 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶 金黄色葡萄球菌菌落特征 金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1mm-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。 金黄色葡萄球菌镜下形态 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。显微图像金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。 金黄色葡萄球菌生化特征 血浆凝固酶试验： 玻片法：5min内出现团块或颗粒状凝块时，而盐水滴仍呈均匀混浊无凝固现象者为阳性，如两者均无凝固现象则为阴性。