色谱法导论预案.ppt

* * * * * * * * * * * 设有两组分A、B，kA=1，kB=0.25，N=5 模似图 当 N 大于103时，趋向于正态分布曲线，此时色谱图如下： 色谱流出曲线方程 实际色谱柱n值很大，为103~106，因而洗出曲线一般趋近正态分布，可近似地用正态分布函数描述溶质分布，除以流动相体积，即可导出浓度变化方程: c0为进样浓度，tR为保留时间，σ为标准偏差，c为时间t时在柱口的浓度。 * 讨论： * 理论塔板的计算公式 色谱峰越窄，塔板数n越多，H越小，柱效能越高。 n说明组分在柱中反复分配平行的次数的多少，n越大，平衡次数越多，组分与固定相的相互作用力越显著，柱效越高。 形象地说明了色谱柱的柱效，是反映柱效能的指标。 能很好地解释色谱图，如曲线形状、浓度最大值位置、色谱峰的宽度和保留值的关系等。 塔板理论的物理意义 塔板理论的成就和局限 塔板理论中的理论塔板数和板高在色谱柱效评价中具有重要实用价值。 然而，色谱是一个动态过程，区别于萃取、精馏等分级过程，不可能实现溶质在两相间真正分布平衡；忽略扩散、传质、瞬间实现平衡的假设也不符合色谱过程分子运动规律。 塔板理论不能说明为何理论塔板数随流动相流速变化；色谱过程中溶质分子分布离散的原因；也未能深入探讨色谱柱结构、操作条件等对理论塔板数或塔板高度的影响，因而对色谱柱制备、操作条件优化等色谱实践的指导作用有限，而这正是色谱理论进一步发展的内在推动力。 2.5.3 速率理论 1956年荷兰学者Van Deemter等在研究气液色谱时，提出了色谱过程动力学理论——速率理论。他们吸收了塔板理论中板高的概念，并充分考虑了组分在两相间的扩散和传质过程，从而在动力学基础上较好地解释了影响板高的各种因素。该理论模型对气相、液相色谱都适用。 速率理论方程 A，B，C为三个常数，A为涡流扩散项，B为分子扩散系数，C为传质阻力系数。 a.涡流扩散项(A) 当流动相带着被分离组分分子通过颗粒大小不同、填充松紧不同的固定相时，会形成紊乱的类似“涡流”的流动，形成流速不同的流路，造成组分谱带的展宽。 速率理论方程 b. 纵向扩散项(B/u) 亦称为分子扩散。浓差扩散是分子自发运动过程。 B-分子扩散项系数 γ -弯曲因子（扩散阻止系数，反映了固定相颗粒的几何形状对自由分子扩散的阻碍情况） Dm-组分在流动相中扩散系数 c.传质项(Cu) C包括流动相传质阻力系数Cm和固定相传质阻力系数Cs 流动相传质阻力项： 固定相相传质阻力项： 总方程： 填充均匀度、担体粒度、载气种类、载气流速、柱温、固定相液膜厚度等对柱效、峰扩张的影响。 影响柱效的变量 a. 流动相流速(u) 当H最小时，一阶导数为零， dH/du = -B/u2 + C = 0 u2最小= B/C ∴ H最小=A+B/u+Cu=A+2(BC)1/2 在最小流速下，分析速度太慢，一般采用双曲线的渐近线或切线与曲线的切点对应下的流速，称最佳实用流速，约为最小流速的两倍。 对于填充柱，N2 的最佳实用线速为10~12 cm/s, H2为15~20 cm/s； 用体积流速表示， N2则为40~60 mL/min-1, H2为60~90 mL/min-1。 b. 填料粒径(dP) 涡流扩散A随dP线性下降。 c. 色谱柱温 温度影响扩散系数Ds和Dm，从而影响分子扩散和传质速率。 T↑，Dm、Ds增大，B/u项↑，Cu项↓，适当提高u，使B/u项减少，Cu项适当增大。 2.6 色谱定性定量分析 2.6.1 定性分析 保留值定性 a. 与已知物对照定性 色谱保留值与分子结构有关，但缺乏典型的分子结构特征，因而只能鉴定已知物。 在同样色谱条件下，用已知化合物与样品中色谱峰对照定性；或将已知化合物加入样品中导致某色谱峰增高定性，这是色谱基本定性方法。 b. 其他定性方法 按保留值经验规律定性。参考文献保留数据定性。 选择性检测响应定性 色谱仪器一般配置通用型和选择性检测器，前者对所有化合物均有响应，后者只对某些类型化合物有响应。 色谱-结构分析