色谱法概论预案.ppt

色谱法概论 定义：一种利用固定相和流动相对组分进行物理或物理化学分离的分析方法 实质：分离 目的：定性分析或定量分析 1．按流动相与固定相的状态分： 一、色谱过程 ● 峰面积A：指色谱曲线与基线间包围的面积 ● 峰高h：色谱峰顶至基线的距离 ● 峰宽W ：色谱峰两拐点切线在基线上的截距 ● 半峰宽W1/2：峰高一半处对应的峰宽 * * * 色素分离示意图 固定相——除了固体，还可以是液体 流动相——液体或气体 色谱柱——各种材质和尺寸 被分离组分——不再仅局限于有色物质 考古学 人类学和法医学 色谱法 化学学科的 所有分支 天体物理、 天文和生物物理 医学、临床化学 药物化学、药学 毒物学 生物学、植物学、 遗传学、微生物学、 分子生物学和动物学 地质学、地球物理学、 地球化学和古生物学 环境科学、 生态学和海洋科学 农业、动物科学 农作物科学、食品科学、 园艺学和土壤科学 材料科学、 冶金学 和高分子科学等学科 流动相 固定相 类型 液相色谱 液体 固体 液-固色谱 液体 液体 液-液色谱 气体 固体 气-固色谱 气体 液体 气-液色谱 气相色谱 三、分类 色谱法 气相色谱法（GC） 液相色谱法（LC） 广义的毛细管电泳法 柱色谱法 经典液相柱色谱法 高效液相色谱法（HPLC） 平板色谱法（TLC、PC） 色谱法简单分类 毛细管柱色谱法 填充柱色谱法 色谱过程与术语 ● 分离组分在两相中的“分配”平衡过程 ● 组分的分配系数不等，移动的速率不等 ● 形成差速迁移而被分离 二、 色谱图 色谱图：由检测器输出的电信号强度对时间或流动相流出体积作图得到的曲线 t 信号 重要信息： 峰数：组分个数 峰位：保留时间，定性 峰强：峰面积，峰高，定量 峰间距：分离度 三、常用术语 基线：仅有流动相通过检测器时的响应信号 噪音：各种未知的偶然因素引起的基线起伏 漂移（drift）：基线随时间向一个方向的缓慢变化 色谱峰：监测器信号随时间变化而形成的流出曲线 峰面积A 标准差σ 峰高h W 峰宽W 半峰宽W1/2 W1/2 保留时间tR 死时间tM 调整保留时间tR/