引种紫锥菊不同部位有效成分含量的动态测定.docx

动态测定引种紫锥菊不同部位的有效成分含量 紫锥菊是地道的美国药用植物，最早可追溯至若干个美国土著民族：路易斯安那州的巧克陶人，用紫锥菊的根治疗咳嗽；科曼奇人用紫锥菊的根治疗咽喉痛；俄克拉马州的晒延人和蒙大拿州的人，则用紫锥菊的叶和根制成水泡剂治疗咽喉痛；晒延人还用紫锥菊的叶泡水来治疗牙痛。总的来说，美国土著居民用紫锥菊来治疗创伤、毒蛇咬伤、扁桃体炎、头痛和感冒这样一些毛病，它就像我国的人参一样，很有传奇色彩。也由此可以看出，紫锥菊全身都是宝，每个部位都有神奇的功效。 20世纪90年代后期，紫锥菊制剂和提取物受到极大关注，我国15个省及直辖市均已成功引种紫锥菊。而由于各个地区气候条件的差异，引种紫锥菊的有效陈分含量也有所差别。接下来，源森生物实验室将引种至山东境内的紫锥菊不同部位有效成分菊苣酸和总多酚进行动态含量测定，探究植株内有效成分变化规律，以更好地知道引种紫锥菊的采收及效果评价： 一、源森生物对引种紫锥菊不同部位有效成分含量测定实验的材料与方法 （一）实验材料 种子采自北京怀柔，2009年秋季撒播于山东中医药大学药用植物园，植株经山东中医药大学周凤琴教授鉴定为菊科松果菊属植物紫锥菊。自2010年5 月5日-11月1日每隔15天取样一次，晒干，将根、茎、叶、花不同部位进行粉碎后过40目筛。 （二）实验仪器与药品 Aglient 1100型高效液相色谱仪 菊苣酸（CAS登录号6537-80-0）、咖啡酸（331-39-5），纯度98%； 甲醇、乙腈均为色谱纯试剂，其他试剂为分析纯。 （三）实验方法 1. 菊苣酸含量测定 （1）色谱条件 色谱柱：Eclipse XDB-C18(5μm，4.6mmx250mm)； 流动相：甲醇-乙腈—0.1%磷酸溶液（体积比为25:10:65）； 流速：1mL.min-1； 检测波长：330nm； 柱温：30℃； 进样量10μL。 （2）标准曲线制备 精密吸取菊苣酸标准品溶液6个不同浓度（0.012、0.024、0.048、0.06、0.12、0.36μg.μL-1）分别进样10μL，上述色谱条件测定峰面积，以进样量为横坐标（x），峰面积积分值为纵坐标（y），绘制标准曲线，计算回归方程y=6*107x-195964，r=0.9998。 实验结果表明菊苣酸在 0.012-3.6μg.μL-1具有良好的线性关系。 （3）供试品溶液制备 精密称取不同生长时期不同部位样品0.40g，加70%甲醇50mL，超声提取30min，吸取滤液5mL，70%甲醇定容至25mL，0.45μm虑膜过滤，即为供试品溶液。 2 总多酚含量测定 参照文献[石晋,栾雨时,赵宁,雪莲果块茎中绿原酸及总酚酸的含量测定中药材]采用比色法，以咖啡酸作为标准品，725nm测定总多酚含量。 二、源森生物对引种紫锥菊不同部位有效成分含量测定实验结果与分析 （一）一年生紫锥菊中不同药用部位菊苣酸含量 一年生紫锥菊不同部位菊苣酸含量动态测定结果见表1，图1： 从幼苗期到枯萎期各部位的菊苣酸含量基本呈现相似变化趋势，茎中菊苣酸含量整体变化不明显，根、叶、花中含量均在7月 4日盛花期达到最高，各部位的菊苣酸含量为叶花根茎。花期过后各部位中菊苣酸含量总体呈现下降趋势，其中根、茎、花比较稳定，但叶中的含量变化较大。 （二）一年生紫锥菊中不同药用部位总多酚含量 一年生紫锥菊各部位的总多酚含量测定结果见表2，图2： 根和叶中总多酚含量较高，茎中较低，花中含量后期变化较大!幼苗期至盛花期各药用部位中多酚含量总体呈现下降趋势，根中总多酚含量高于叶；盛花期后，花中总多酚含量明显降低，根、茎、叶中总多酚含量总体呈上升趋势并在枯萎期趋于稳定。总体而言，紫锥菊中总多酚含量在一年生长期的不同阶段和不同器官中差异均不明显。 三、源森生物对引种紫锥菊不同部位有效成分含量测定实验结果讨论 研究结果表明，紫锥菊中总多酚含量在不同生长时期及不同器官中差异均不明显，但叶、花和根的菊苣酸含量随生长期不同呈现差异性，因此紫锥菊的采收期取决于菊苣酸含量。 紫锥菊不同部位菊苣酸含量最大值均出现在7月盛花期左右。花中菊苣酸和总多酚含量在盛花期后都有明显降低，可能与果实成熟后花的凋落有关。因此，对于一年生紫锥菊，其最佳采收期为盛花期，与其在原种地的采收时期一致。紫锥菊为多年生植物，其根中有效成分的变化规律有待进一步研究。 源森生物实验室认为：从本文的最终试验结果看来，引种至山东的紫锥菊与同期怀柔、南京、临沂、蒙阴引种植株相较有效成分菊苣酸和多酚含量偏高。说明山东的气候条件更适合紫锥菊植物的生长，这为山东地区进行大规模紫锥菊种植提供了理论依据，广大植物提取物企业可考虑将其作为紫锥菊的原料主产地。