分子生物学(二)复习重点.docVIP

名词解释: Housekeeping gene 持家基因 house-keeping genes ：又称管家基因，是指所有细胞中均要表达的一类基因，其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的。 P 指一个基因上发生的突变可抑止距其操纵子内启动子较远一侧基因的表达。无意义突变多数都显示极性效应，但一般在其该突变顺反子内的位置，距启动子愈近，对操纵子后面的极性效应也愈强。 D 显性负突变：在广义上，凡一对等位基因中因其中一个突变或丢失所致的另一个正常等位基因的功能活性丧失，都称为显性负突变。换言之，显性负突变即杂合的突变产生了纯合突变的效应。例如，在某些肿瘤中，抑癌基因p53的一个等位基因的失活导致另一个正常等位基因也失去活性。 C 分解代谢物阻遏又被称为葡萄糖效应，这是因为葡萄糖是首先被发现具有这种阻遏效应的物质。当培养基含有多种能源物质时，微生物首先利用更易于分解利用的能源物质，而首先被利用的这种物质的分解对利用其他能源性物质的酶的产生有阻遏作用。 P 每一噬菌体除了能使宿主细菌裂解死亡外，还有一些噬菌体感染细菌后，并不使细胞死亡，称为溶原性噬菌体，这些噬菌体感染细菌后，将其自身的基因组整合进宿主细胞的基因组，此时，这种宿主细菌称为溶原性细菌。溶原性细菌内存在的整套噬菌体DNA基因组称为原噬菌体 prophage ，溶原性细菌不会产生许多子噬菌体颗粒，也不会裂解；但当条件改变使溶原周期终止时，宿主细胞就会因原噬菌体的增殖而裂解死亡，释放出许多子代噬菌体颗粒。 乳糖操纵子包括正调控和负调控：正调控：cAMP—CRP复合物促进转录。负调控：阻遏蛋白结合在操纵基因上阻止转录。色氨酸操纵子有阻遏系统和弱化系统：阻遏系统：辅阻遏蛋白与色氨酸结合形成有活性的阻遏物与操纵区结合，关闭转录；缺少色氨酸时，转录打开。弱化系统：当有大量色氨酸时，形成弱化子结构，终止转录：缺少色氨酸时，无法形成弱化子结构，故转录继续。乳糖操纵子属于分解代谢，色氨酸操纵子属于合成代谢。 CAP与cAMP形成的复合物可以促进RNA聚合酶与启动子的结合.只有在没有葡萄糖,且操纵子没有被阻遏蛋白占据的情况下,RNA聚合酶才能与启动子的结合 例如也缺少乳糖 .加入CAP基因突变,则无CAP-cAMP复合体结合在CAP位点,在这种情况下,NA聚合酶就不能识别启动子并与之结合,操纵元就不能被表达. 裂解状态 1.比较siRNA和miRNA的异同点 siRNA 和miRNA比较 ?相同点/联系点 siRNA miRNA 长度及特征 都约在22nt左右，5’端是磷酸基，3＇端是羟基 合成的底物 miRNA和siRNA合成都是由双链的RNA或RNA前体形成的 Dicer酶 依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物，所以具有Dicer产物的特点 Argonaute家族蛋白 都需要Argonaute家族蛋白参与 RISC组分 二者都是RISC组分，所以其功能界限变得不清晰，如二者在介导沉默机制上有重叠；产生了on target和off target的问题 作用方式 都可以阻遏靶标基因的翻译，也可以导致mRNA降解，即在转录水平后和翻译水平起作用 进化关系 可能的两种推论：siRNA是miRNA的补充，miRNA在进化过程中替代了siRNA 不同点/分歧点 siRNA miRNA 机制性质 往往是外源引起的，如病毒感染和人工插入dsRNA之后诱导而产生，属于异常情况 是生物体自身的一套正常的调控机制 直接来源 长链dsRNA 发夹状pre-miRNA 分子结构 siRNA是双链RNA，3‘端有2个非配对碱基，通常为UU miRNA是单链RNA 对靶RNA特异性 较高，一个突变容易引起RNAi沉默效应的改变 相对较低，一个突变不影响miRNA的效应 作用方式 RNAi途径 miRNA途径 生物合成，成熟过程 由dsDNA在Dicer酶切割下产生;发生在细胞质中 pri-miRNA在核内由一种称为Drosha酶处理后成为60nt的带有茎环结构的Precursor miRNAs pre-miRNAs ；这些pre-miRNAs在转运到细胞核外之后再由Dicer酶进行处理，酶切后成为成熟的miRNAs；发生在细胞核和细胞质中 Argonaute AGO 蛋白质 各有不同的AGO蛋白质 各有不同的AGO蛋白质 互补性（complementarity） 一般要求完全互补 不完全互补，存在错配现象 RISCs的分子量不同 Martinez and Tuschl, 2004; Martinez et al., 2002; Nykanen et al., 2001; Pham et al., 2004 siRISCs miRISCs/miRNP 各自的生