温度与酶.docVIP

探究温度对酶活性的影响一．探究目的通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性，了解温度对酶活性的影响。二．探究原理酶的催化作用受温度的影响很大，一方面与一般化学反应一样，提高温度可以增加酶促反应的速度。通常温度每升高10℃，反应速度加快一倍左右，最后反应速度达到最大值。另一方面酶的化学本质是蛋白质，温度过高可引起蛋白质变性，导致酶的失活。因此，反应速度达到最大值以后，随着温度的升高，反应速度反而逐渐下降，以至完全停止反应。反应速度达到最大值时的温度称为某种酶作用的最适温度。高于或低于最适温度时，反应速度逐渐降低。一种酶的最适温度不是完全固定的，它与作用的时间长短有关，反应时间增长时，最适温度向数值较低的方向移动。通常测定酶的活性时，在酶反应的最适温度下进行。为了维持反应过程中温度的恒定，一般利用恒温水浴等恒温装置。三．材料和用具1．稀释200倍的唾液。2．碘化钾-碘溶液：将碘化钾20克和碘10克溶解在100ml水中，使用前稀释10倍。???????????????????四．问题的提出（要求学生做实验前知道上，实验后写到实验报告上。）1．认真观察不同温度下三支试管中的颜色有什么变化？2．酶在什么样的温度条件下活性最好？3．查资料说明为什么温度会影响酶的活性？4．在整　个实验过程中我们应注意什么？五。探究步骤唾液淀粉酶可将淀粉逐步水解成各种不同大小分子的糊精及麦芽糖。它们遇碘各呈不同的颜色。直链淀粉(即可溶性淀粉)遇碘呈蓝色；糊精按分子从大到小的顺序，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色，最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈现颜色。由于在不同温度下唾液淀粉酶的活性高低不同，则淀粉被水解的程度不同，所以，可由酶反应混合物遇碘所呈现的颜色来判断。1．?????????取3支试管，编号后各加入淀粉溶液2毫升。2．?????????将第l、2号试管放入37℃恒温水浴中保温，第3号试管放入冰水中冷却，5分钟后，向第l号试管中加人煮沸5一15分钟的稀释唾液l毫升；向第2、3号试管加稀释唾液各l毫升，摇匀。3．?????????20分钟后取出3支试管，各加碘化钾-碘溶液2滴，混匀，比较各管溶液的颜色。4．?????????判断淀粉被唾液酶水解的程度，井说明温度对唾液酶活性的影响。?实验时，按照课本上的方法步骤是：（1）取3支洁净的试管，编上号，并且分别注入2mL质量分数为3%的可溶性淀粉液；（2）将3支试管分别放在60℃左右的热水、沸水、冰块中各维持5min；（3）取出，分别滴入1mL质量分数为2%的新鲜淀粉酶溶液，摇匀后，再在各自温度中维持5min；（4）在3支试管中分别滴入1滴碘液，观察现象。按照课本实验原理的推测，沸水和冰块中的试管应变蓝色，而60℃?????? ?对于步骤（1）和（2）没有什么问题，关键是出在第（3）步骤上，根据实验原理的设计，先将3只盛有可溶性淀粉液的试管处在60℃左右热水、沸水、冰块中，目的是使淀粉液达到实验所要求的不同温度条件下，探索出不同温度对淀粉酶活性的影响。但是，步骤（3）中滴入的是常温下的淀粉酶溶液，常温下，溶液的温度维持在15℃—20℃左右，这样，当滴入淀粉酶溶液后，试管中的温度必然会发生改变：?????? ?基于上述分析，我认为，可在方法步骤中略做改动：???（1）取3只洁净的试管，编上号，分别注入2mL质量分数为3%的可溶性淀粉液；同时，再取3支洁净试管，分别注入2mL质量分数为2%的新鲜淀粉酶溶液。（2）将3支盛有淀粉液的试管分别放入60℃左右的热水、沸水、冰块中，同时，在三种温度中各放入一个盛有淀粉酶溶液的试管，维持各自的温度5min。（3）将三种温度下的淀粉酶溶液分别倒入各自温度下的3支淀粉液试管中，摇匀后，维持各自的温度5min。（4）在3支试管中各滴入1滴碘液，摇匀，观察其颜色变化。注：置于沸水中的试管取出后要在温度降低到70℃左右后再滴碘液改动后的方法步骤中，尽量减少了温度的瞬间改变对实验的影响，所以，实验结果与预期结果相吻合：60℃左右，淀粉酶对淀粉液有消化作用，滴入碘液后不变蓝色；沸水中酶的活性被破坏，即经过高温后的淀粉酶对淀粉液无消化作用，滴入碘液后，溶液变蓝色；冰块中，淀粉酶的活性被抑制，溶液暂时变蓝色，但在室温中放置3--5min后，由于温度的上升，酶的活性逐渐恢复，抑制作用逐渐被解除，所以试管中的蓝色逐渐消失。学习“温度对酶活性的影响”实验过程中，以下几问值得思考：?1．同为探究淀粉酶的作用效果，指示剂选择为何有区别？?在“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”和“温度对酶活性的影响”实验中，选择指示剂时却截然不同，前者选择斐林试剂，后者选用碘液。原因在于：?“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用”是为了确定被检物质中是否有还原糖的存在，进而确定反应是否进行，从而说明淀粉酶只对淀粉起催化作用，对蔗糖不起作用。如果