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现代试管婴儿选精技术 选精技术 生男生女更多的是看男性，选精技术是满足了人们对宝宝性别的要求。男性的要求能在体外收集到精液，并有精子 。一般认为，一次射出的精液不少于０．５ｍｌ，精子密度不低于１０００万／ｍｌ，精液的常规检查指标，越趋正 常，其授精成功率越高。 精子的体外筛选技术 随着辅助生殖技术的发展，多种体外优筛精子的技术也应运而生。目前，在临床应用的体外优选、分离精子的方法有多种，主要有：玻璃纤维滤过法、精子上泳法、精子下泳法、血清白蛋白滤过法、Ｐｅｒｃｏｌ梯度分离法与迁移沉淀法（ｍｉｇｒａｔｉｏｎｓｅｄｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ）等。 五星生殖中心的选精技术是国内最先进的，在国内外很多学术报刊上发表过多次试管婴儿选精论文。 （一）精子上泳分离技术 其原理是基于可运动的精子具有游过液体界面而向培养液中扩散的能力，从而自行与死精子、凝集精子、畸形精子、白细胞及杂质分离，因此可通过上泳分离出高活力的精子。虽然精子的迁移能力和其受精能力之间的关系尚需进一步研究，但近１０多年的临床应用中已有大量的资料证实其效果是明显的。 １．试剂 （１）培养液：改良Ｆ１０培养液，Ｅａｒｌｅ培养液，Ｂ２ 培养液等 （参见“几种常见培养液配方介绍”一节）。 （２）人血清白蛋白（ＨＳＡ）或灭活无菌脐带血清等。上泳时，可将ＨＳＡ适量加入培养液中（１ｇ／Ｌ）或灭活无菌脐带血清加入培养液中（１００ｍｌ／Ｌ）。 ２、操作方法 （１）取一尖底离心管，将液化后的精液移入试管内，加入等量培养液（也可先将培养液加入试管中，后加入精液），用吸管轻缓吸吹洗涤半分钟； （２）离心，３００×ｇ，５分钟； （３）弃上清，再加入４ｍｌ培养液； （４）离心，３００×ｇ，５分钟； （５）弃上清，下层留下０．８ｍｌ～１．０ｍｌ沉淀物，用吸管轻轻混匀后，小心在上层加入２．０ｍｌ含人血清白蛋白或灭活无菌脐带血清的培养液。在３６．０℃水浴箱中或普通培养箱中垂直或４５°角倾斜静置３０分钟（试管加塞）；或在３６．０℃ＣＯ２孵箱中垂直或４５°角倾斜静置３０分钟（试管可不加塞）。 （６）吸取上层悬液（含高活力精子）。 ３．注意事项 （１）上述分离如用于人工授精或体外受精等辅助生育技术中，则需无菌操作，最后精子密度应调至４００万／ｍｌ～１０００万／ｍｌ为宜。 （２）人血清白蛋白绝对需要经过高度提纯和不受病毒和细菌的污染，国外已有此类制剂供应（比如ＩｒｖｉｎｅＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＳａｎｔａＡｎａ，ＣＡ，ＵＳＡ；ＡｒｍｏｕｒＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｅａｓｔｂｏｕｒｎｅ，ＵｎｉｔｅｄＫｉｎｇｄｏｍ）。 ４．评价 采用上泳法分离精子，能明显地提高精子的活动率，生存时间，正常形态精子的百分率和增加具有正常浆膜的精子数， 且显著提高精子的运动速度。有许多文献提示，精子上泳技术分离之精子与受精率相关性最高，也就是说最能代表精子 的潜在受精能力。其主要缺点是精子的回收率较低。 （二）精子的下泳分离技术 １．试剂 （１）培养液：具体操作同上泳法。 （２）灭活血清：抽配偶血４ｍｌ，室温或３７℃水浴箱中析出血清后，小心分离出血清（勿溶血），置５６℃灭活３０分钟。 ２．操作方法 （１）取一５ｍｌ尖底刻度离心试管或Ｆａｌｃｏｎ试管，将１．０ｍｌ灭活血清置放在试管底部； （２）将０．５ｍｌ～１．０ｍｌ精子悬液（经洗涤３次，洗涤方法同上泳法）轻缓置入血清上，形成界面； （３）在３６．５℃中孵育１０分钟； （４）将一细长滴管插入试管底部吸取包含活动精子的大部分血清（授精待用精子悬液）。 注意事项同上泳法。 ３．评价 上泳法精子要克服重力向上游动，故回收率低，下游法则避免了这一缺点，因而提高了精子的回收率。 （三）玻璃纤维过滤分离技术 １９７７年Ｐａｕｌｓｏｎ等利用玻璃纤维法分离精子，获得较好效果。该法可以清除大量死亡的、未成熟的、结构 异常的和(或）凝集的精子，尤其适用于粘度高，难以液化的精液。 １．材料 （１）小号（５英寸）巴氏试管； （２）硅酸玻璃纤维丝约６０ｍｇ； ２．操作方法： （１）将６０ｍｇ玻璃纤维素装入小巴氏吸管中，注意填入的玻璃纤维丝应松紧适当，如太紧，即使活力再好的精子也不能通过。如太松，则不能阻挡精液中的死精子和其他细胞碎屑。 （２）用蒸馏水反复滤过，直至滤过液中无玻璃纤维丝存在，晾干待用。 （３）临用时将吸管垂直固定在管架上，用培养液滤过一次，然后将液化后精液加在纤维分离柱上面，用一洁净容器收 集下面滤出的精子悬液（含活力较好的精子），并调节至适当密度，待用。 注意事项同上泳法。 ３．评价 通过玻璃纤维滤过，虽然损失相当多的精子，特别是质量较差的精液，但滤过的精液几乎保留了所有的活精子，因此显著地提高了活动精子，前向活动精子及有完整功能性膜的精子的百分率，特别是质量差的标本，分离效果更佳。