教育文件生物化学79.ppt

Southern 杂交 方法如下： 未知的DNA --DNA限制性内切酶→ DNA片段 --→ 琼脂糖电泳分离 --→ 碱液变性 --→ 影印在硝酸纤维薄膜上 --→ 与放射性标记的已知DNA单链或RNA杂交 --→ 放射自显影 Northern Blotting（北印迹） Northern Blotting（北印迹）：用已知的DNA钓mRNA，方法如下： 众多未知的RNA --→ 电泳分离 --→ 变性 --→ 影印 --→ 用标记的已知DNA单链杂交 --→ 放射自显影 Western Blotting（西印迹） Western Blotting（西印迹）：蛋白质与抗体的杂交，跟核酸无关。 研究DNA分子中某一种基因的位置 定两种核酸分子间的序列相似性 检测某些专一序列在待检样品中存在与否 是基因芯片技术的基础 核酸分子杂交的应用 核酸分子杂交的意义： 发现原核生物的基因是连续基因，而真核生物的基因是断裂基因。 连续基因：基因中的bp序列能够连续的在成熟的蛋白质中找到其相应的AA，电镜显示这种基因能够和它的成熟mRNA形成平滑的杂交分子。 断裂基因：基因中的bp序列能够断续的在成熟的蛋白质中找到其相应的AA，电镜显示这种基因和它的成熟mRNA只能形成带泡的杂交分子。见讲义草图P78 发现癌基因的普遍性：肿瘤病毒的RNA能够与人类正常的DNA分子形成带泡的