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细胞工程基础 了解与细胞工程相关的生物学、细胞学、细胞生物学和分子生物学有关学科知识 掌握细胞分化与全能性 细胞组成 细胞周期与细胞分裂 细胞凋亡与细胞坏死 细胞分化与脱分化 组织与器官 生殖与发育 1. 细胞组成 细胞是生命结构和功能的基本单位，是生命活动的基本单元。 1665年，英国Hooke用显微镜观察软木时发现蜂窝状的小孔，称之为细胞（cell）。 1.1 分子组成 O, C, H, N, P, S, K, Ca, Mg等 1.2 结构组成 细胞膜（内膜系统）与细胞壁 细胞液 细胞溶质：细胞之内处于各个细胞器官之外的区域。 占细胞体积的55%左右。含上千种酶，催化糖酵解、糖合成、脂肪酸、氨基酸的合成。 内含细胞骨架，保持细胞形状，组织生化反应，帮助细胞运动。 细胞器 线粒体 叶绿体 核糖体 细胞核 真核细胞中的细胞控制中心 包含遗传信息（染色质） 与细胞中的其它细胞器通讯 2. 细胞周期与细胞分裂 细胞周期（cell cycle）是指一个细胞经生长、分裂增殖成两个细胞所经历的全过程。 细胞周期包括细胞间期与分裂期（M期）。 3. 细胞凋亡与坏死 死亡是生命的普遍现象，但细胞死亡并非与机体死亡同步。正常的组织中，经常发生“正常”的细胞死亡，它是维持组织机能和形态所必需的。细胞死亡的方式通常有2种：①细胞坏死（necrosis）。②细胞凋亡（apoptosis）/细胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）。 细胞凋亡 细胞凋亡（cell apoptosis）是借用古希腊语，表时细胞象秋天的树叶一样凋落的死亡方式。 1972年Kerr最先提出这一概念，他发现结扎大鼠肝的左、中叶门静脉后，其周围细胞发生缺血性坏死，但由肝动脉供应区的实质细胞仍存活，只是范围逐渐缩小，其间一些细胞不断转变成细胞质小块，不伴有炎症，后在正常鼠肝中也偶然见到这一现象。 细胞凋亡是机体维持环境稳定、有基因控制的细胞自主的有序性死亡。 凋亡细胞的主要特征： ①染色质聚集、分块、位于核膜上，胞质凝缩，最后核断裂，细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体； ②凋亡小体内有结构完整的细胞器，还有凝缩的染色体，可被邻近细胞吞噬消化，因始终有膜封闭，没有内溶物释放，故不会引起炎症； ③凋亡细胞中仍需要合成一些蛋白质，但是在坏死细胞中ATP和蛋白质合成受阻或终止； ④核酸内切酶活化，导致染色质DNA在核小体连接部位断裂，形成约200bp整数倍的核酸片段，凝胶电泳图谱呈梯状； 细胞凋亡的检测 2002年10月7日英国人悉尼·布雷诺尔、美国人罗伯特·霍维茨和英国人约翰·苏尔斯顿，因在器官发育的遗传调控和细胞程序性死亡方面的研究 ，获诺贝尔生理与医学奖。 细胞坏死 是细胞受到化学因素（如强酸、强碱、有毒物质）、物理因素（如热、辐射）和生物因素（如病原体）等环境因素的伤害，引起细胞死亡的现象。 坏死细胞的形态改变主要是由下列2种病理过程引起的，即酶性消化和蛋白变性。参与此过程的酶，如来源于死亡细胞本身的溶酶体，则称为细胞自溶（autolysis）；若来源于浸润坏死组织内白细胞溶酶体，则为异溶（heterolysis）。 细胞坏死初期，胞质内线粒体和内质网肿胀、崩解，结构脂滴游离、空泡化，蛋白质颗粒增多，核发生固缩或断裂。 随着胞质内蛋白变性、凝固或碎裂，以及嗜碱性核蛋白的降解，细胞质呈现强嗜酸性，故坏死组织或细胞在苏木精/伊红染色切片中，胞质呈均一的深伊红色，原有的微细结构消失。在含水量高的细胞，可因胞质内水泡不断增大，并发生溶解，导致细胞结构完全消失，最后细胞膜和细胞器破裂，DNA降解，细胞内容物流出，引起周围组织炎症反应 。 5.组织与器官 组织（tissue）是相同来源的细胞群组成的结构功能单位。 植物组织分为分生组织和永久组织两大类。 分生组织（meristem tissue）是植物中，能够快速的有丝分裂并分化成新生组织及导致植物生长的那部分组织。如茎尖和根尖。 永久组织（permament tissue）是失去分裂能力，分化为具有特定功能的细胞组织。 器官（organ）是由不同的组织按照一定规律和空间布局形成的生物体局部的特定形态结构。如心、肝、脾、肺、肾；根、茎、叶、花、果实、种子等。 6. 有性生殖 * * 无机物 有机物 水（总重的75-80%） 无机盐（干重的2-5%，离子形式） 蛋白质 核酸 脂质 糖类 （干重的90%以上） 原核细胞 真核细胞 ?PS（磷脂酰丝氨酸）外翻（Annexin-V /PI） TUNEL 细胞凋亡和细胞坏死的区别 有，释放内容物。 无，不释放细胞内容物 炎症反应 被动进行 受基因调控 调节过程 无 有 蛋白质合成 随机降解，电泳图谱呈涂抹状 有