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双向电泳技术服务 篇一：033111113036 双向凝胶电泳技术原理与应用 双向凝胶电泳技术原理与应用 Principle and application of two-dimensional gel electrophoresis 姓名：XX 班级：检验本科1113班 学号：XXX 【摘要】 人类基因组计划与美国塞莱拉遗传信息公司于2001年在美国《科学》杂志和英国《自然》杂志联合宣布，他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱，至此，人类基因组计划已基本完成，随着后基因组时代的到来，蛋白质组学得到了空前的发展，蛋白质组研究旨在揭示基因表达的真正执行生命活动的全部蛋白质的表达规律和生物功能。包括蛋白质组、蛋白质组学、功能蛋白质组学和结构基因组学等新的概念的提出，蛋白质组学已成为当今生物领域中极其活跃的学科。其中双向电泳（two-dimensional electrophoresis，2.DE）是蛋白质组研究的三大关键核心技术之一 【 abstract 】Human gene group plans and United States sailaila genetic information company Yu 2001 in United States Science under magazine and United Kingdom natural under magazine joint announced, they draws out has accurate, and clear, and complete of human gene Group map, at this point, human gene group plans has basic completed, as Hou gene group era of comes, protein group learn get has unprecedented of development, protein group research aimed at reveals gene express of real implementation life activities of all protein of express law and biological function. Includes proteome, proteomics, structural proteomics and functional genomics of new concepts, such as proposed, proteomics has become extremely active in the field of biological sciences. Two-dimensional gel electrophoresis (two-dimensional electrophoresis,2.DE) is one of the three key core technologies of proteome research 【关键词】双向电泳；蛋白质组学； 后基因组时代 【 key words 】two-dimensional electrophoresis，2.DEproteomics Post-genomics era 【前言】由于蛋白质的等电点和分子量是两个彼此不相关的重要性质，而2.DE同时利用了蛋白质间的这两个性质上的差异分离蛋白质，因此2.DE的分离能力非常强大，它甚至能将细胞中的5000种蛋白分离开，2.DE在分离蛋白混合样品、比较差异方面有不可替代的作用，结合质谱鉴定技术可查明大型蛋白复合物各组组分，与其他生物技术如分子生物学、分子遗传工程、免疫学、微量蛋白质的自动氨基酸序列分析相结合，可以快速准确地发现和鉴定新的蛋白质。 【1-3】【荧光定量PCR的基本原理】 双向电泳由于具有高分辨率和高灵敏度已成为分析复杂蛋白混合物的基本工具［1］ 。自1975年O#39;Farrel等［2］ 建立这种技术后，已有许多改进，使得这一技术日趋完善。2-DE是利用蛋白质的带点性和分子量大小的差异，通过两次凝胶电泳达到分离蛋白质的技术。第一向电泳是依据蛋白质的等电点不同，通过等电聚焦电泳（isoelec-tricfocusing，IEF）将不同净电荷的蛋白质在PH梯度介质中外加电场作用形成分离的蛋白质区带。然后将凝胶包埋在SDS凝胶板上端，根据蛋白质分子量的不同，在垂直或水平方向进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS），即第二向电泳;在IEF中，蛋白质因等电点不同而被分离;在SDS.PAGE中，不同分子量的蛋白质相互间