第五章基因克隆的载体系统2014重点分析.ppt

第五章 基因克隆的载体系统 概述 1、 载体（vector）概念 能将外源DNA分子携带进入宿主细胞,并进行复制或表达的工具称为载体。 用来进行基因组克隆、cDNA克隆或亚克隆的DNA分子。 按功能分为克隆载体和表达载体。 载体的功能 运送外源基因高效转入受体细胞 为外源基因提供复制能力或整合能力 为外源基因的扩增或表达提供必要的条件 2 载体的特点 能在宿主细胞内独立复制； 有选择标记，易于识别和筛选； 可插入一段较大的外源DNA分子而不影响自身复制； 有合适的限制性酶切位点 第一节 克隆载体 用于携带DNA片断进入宿主细胞进行复制或保存的载体称为克隆载体。  主要的克隆载体 质粒载体 噬菌体载体 柯斯质粒载体 单链DNA噬菌体载体 噬菌粒载体 动物病毒 一、 质粒载体 （一）质粒一般生物学特性 １质粒的概念 质粒是生物细胞内固有的、能独立于寄主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子，并不是细菌生长所必需的，但可以赋予细菌某些抵御外界环境因素不利影响的能力。 质粒常见于原核细菌和真菌中 绝大多数的质粒是DNA型的(酵母的杀伤质粒是一种RNA) 质粒DNA的分子量范围：1 - 300 kb ２主要构型 SC构型 cccDNA OC构型 开环DNA L构型 线性DNA 3 质粒的基本特性 1）自主复制性复制起始区（replica