人白介素18(IL18)RGD模体抗黑色素瘤概要.doc

人白介素18(IL18)RGD模体抗黑色素瘤 细胞B16活性研究 卢忠民赵宝昌* （大连医科大学 生物化学和分子生物学教研室大连116027） 摘要利用定点突变及DNA重组技术，在人白细胞介素18(IL18)的cDNA序列中插入了GGC序列，使IL18第39精氨酸残基和第40天冬氨酸残基之间插入一个甘氨酸残基，从而构建了RGD模体。此重组的cDNA序列构建入表达质粒pPIC9K，并转化Pichia Pastoris酵母GS115，利用表达系统进行了高效表达。用Sephadex G100凝胶过滤纯化表达产物，获得初步纯化的蛋白。研究表明，IL18在体外对黑色素瘤细胞株B16没有作用，而IL18RGD抑制作用明显，IC50 = 810μmol/L；应用小鼠动物模型研究结果显示，IL18及IL18RGD均对黑色素瘤细胞B16有抑制作用，且IL18RGD比IL18的作用强；同时,对鸡胚绒毛尿囊膜(chicken chorioallantoic membrane,CAM)血管生成的抑制实验发现， IL18RGD 对CAM血管生成的抑制作用也比IL18强。但IL18RGD仍保存对PBMC诱导产生IFNγ能力。结果提示，IL18RGD在具有抗炎，抗感染作用的同时增添了抑制肿瘤血管新的功能。 关键词IL18RGD模体毕赤酵母B16细胞 中图分类