饮用水单一毒性快速检测方法--作品(论文).docVIP

饮用水单一毒性快速检测方法 学院：资源与材料学院 作者：冯茹 伍艳馨 郝晓霞 李敏 闫凯丽 刘梅杰 张承基 摘要：本文主要利用淡水发光菌-青海弧菌q67检测CdCl2、HgCl2、K2Cr2O7的单一毒性以及联合毒性，探究在安全范围内的饮用水评价标准，根据数据通过线性回归分析后计算EC50值，对比不同重金属化合物对青海弧菌的影响。 关键词：发光菌 ；饮用水；快速检测 ；重金属化学物 中图分类号：X131.2 文献标识码：A 1 引言 随着工业和科学技术的不断发展，饮用水的安全性也受到了一定的影响。现今，由于各种饮用水污染事故的频发，使得人们对饮用水的安全更加重视，相关领域专家对其进行了一系列的研究。因为发光菌具有灵敏度高、检测快速的优点，被广泛应用于重金属化合物的急性毒性检测中。本文利用青海弧菌检测汞、镉、铬的单一毒性，比较不同重金属对发光菌的抑制程度以及时间对发光菌的影响。其中将汞作为标准毒物。 2 发光菌简介 2.1发光菌在毒性检测中的作用原理 发光细菌法是利用灵敏的光电测量系统测定毒物对发光细菌发光强度的影响判断毒物毒性的大小。发光细菌含有荧光素荧光酶等发光要素在有氧条件下通过细胞内生化反应会产生微弱荧光。当细胞活性升高处于积极分裂状态时其含量高发光强度增强，发光细菌在毒物作用下细胞活性下降，含量水平下降导致发光细菌发光强降低。实验显示毒物浓度与菌体发光强度呈线性负相关关系，因而可以根据发光细菌发光强度判断毒物毒性大小，用发光度表征毒物所在环境的急性毒性。 2.2发光菌应用现状 近年来水污染问题日益严重，成为严重威胁人类生命健康成为世界性的环境治理难题。 科学研究工作者已开发出许多灵敏有效的环境监测方法这些方法可以划分为两类：分析技术和生物监测。分析技术常常用于废水常规指标的测试但不能反应水质综合毒性的大小。传统的生物监测以水蚤藻类或鱼类为受试对象虽然能反映毒物对生物的直接影响。但是这些方法的最大缺点是实验周期长实验过程比较繁琐。针对传统生物毒性检测方法的不足，作为一种新型的生物监测技术发光细菌法表现出了以下四个突出的特点： 灵敏、快速且容易进行 发光菌容易培养 可以用来检测污染物有无致癌作用 青海弧菌仅需要达到生理盐水（0.85%的盐度）的渗透压环境即可。 除此之外，它不仅能测定单因子指标还能快速准确测出环境的综合毒性指标具有理化法无可比拟的优势因此发光细菌法近年来受到了环境工作者的广泛关注。 3 实验材料与方法 3.1 实验仪器与试剂 3.1.1 实验仪器 （1） 北京滨松光子技术有限公司 （） Dragon Laboratory Instruments Limited （）型电子天平 等级 厂家 Hgcl2 分析纯（AR） 天津科密欧化学试剂有限公司 K2Cr2O7 分析纯（AR） 天津科密欧化学试剂有限公司 CdCl2·H2O 分析纯（AR） 天津科密欧化学试剂有限公司 复苏液 北京滨松光子技术有限公司 渗透压调节液 北京滨松光子技术有限公司 3.2 实验材料 模拟配制不同浓度梯度的重金属溶液 通过查阅文献，找到合适的浓度范围，通过预实验，设置一组合适的单一毒性的浓度梯度。 菌种的选取 由提供的（Vibrio qinghaien- sissp.nov.）小种。实验室温度控制在20~25℃范围，同一批样品在测定过程中温度波动不超过±1℃。取一支小种冻干粉瓶，加入复苏液，手持瓶充分混匀菌液， 3.3.2 单一毒性EC50的测定 取2mL测试管，每个浓度点设两个平行，每个平行含支样品管和支空白对照管，将测试管放好，依次加入2mL重金属样品溶液（） 用错误!未找到引用源。L的移液枪准确吸取错误!未找到引用源。L复苏菌液，逐一加入各管，每管在加菌液的当时精确计时，记录到秒，即为样品与发光菌反应起始时间，每管加菌液间隔时间控制在5s，自加菌液时间起15min后，将测试管放入生物毒性测试仪内，测定发光量。 发光菌的发光抑制率，计算公式如下： 相对发光强度（%）错误!未找到引用源。 发光抑制率（%）=1相对发光强度 使用发光抑制率等于50%时样品的浓度值EC50来表达，EC50是指能引起50%最大效应的浓度。对-效应曲线进行拟合模型参数中，C表示曲线对原点的相对位置，XC越大整个剂量-效应曲线水平位移越大。a值描述曲线的斜率，a当a增大时，曲线 解析式 Slogistic1 y = a/(1 + exp(-k*(X-XC))) 经典化学中特别是分析化