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培训课件_血凝的基本知识.ppt

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* 1 * 各类血凝仪的原理及特点 -主要进口血凝仪(2) 名称 原理 所用试剂 血凝仪主要特点 Stago 半自动 磁珠法 Stago原装 APTT试剂只有APTT(白) TT(血浆:试剂为1:1) 半自动血凝仪上其他种类试剂的APTT(鞣化酸) 全自动 磁珠法 同上 上试剂需有密码,不要进行Fib定标,Fib校准品校正即可 太平洋 PH-1 PH-2 PH-4 光学法 (散射法) 太平洋试剂,APTT(鞣)及(白)均有,APTT(白)为液体型,TT(血浆:试剂为2:1)。复溶后稳定时间短,需分装冷冻保存,Fib低浓度时重现性差 Fib衍算及单独测试均可以。 德高TECO-BC TECO-BC TECO-M4 光学法 太平洋试剂 类太平洋血凝仪 BC-血凝杯大 M-型血凝杯小(最小容许量75 蓝波BioLaBo 半自动 全自动 涡流密度法 (光学+机械结合) 蓝波试剂。TT(血浆:试剂为2:1),Fib试剂内含量白陶土,其缓冲液内含有纤溶抑制剂 美创(MC) 半自动 类太平洋 荷兰欧加侬ORGANON 散射光比浊法 阿克苏试剂,TT(血浆试剂为2:1) 生物梅里埃 涡流密度法 梅里埃试剂(Fib试剂内含有白陶土);TT试剂(血浆:试剂为2:1) * 1 * 纤维蛋白原含量测定(Fib)--衍算法 PT衍算Fib也称间接法测定Fib(Derived)。具体方法是,对标本进行PT测定的同时,即能得出Fib的含量。测定时不需用Fib的试剂(凝血酶试剂),只用PT试剂。 PT衍算Fib在测定前也需先定标,一般是用Fib含量准确性的质控血浆,用生理盐水进行稀释(如100%,75%,50%,25%)得到不同浓度的Fib的标准系列,再对其进行PT的凝固时间测定及△E(光密度变化)测定,然后把Fib浓度含量降低,其凝固的OD值也会降低,并呈线性相关,以此达到Fib定量的目的。 * 1 * 有关PT衍算Fib 应避免的误解: 误区一:PT衍算Fib是通过PT结果“算”出来的。实际上是依据不同量Fib凝块光密度不同,而测定出来的。 误区二:衍算时PT结果一定与法Fib含量相关。其实有的样本PT正常但Fib可能不正常,或者Fib正常的标本PT有可能不正常。 误区三:PT衍算Fib方法简简便,准确。实际上,超过正常Fib含量的标本,误差很大。 PT衍算法不准确,估算值,国外已淘汰 * 1 * 选择Fib的要点 标准曲线的相关性: r0.995 开平后试剂的稳定型: 长岛液体Fib试剂:37℃,稳定20天以上; 其他国产Fib冻干粉试剂:37 ℃,稳定24小时。 * 1 * Fib检测的注意点 尽量不用衍算法,不准确; 标本中纤维蛋白原含量如超出所用所用试剂的线性范围,必须作适当的稀释后再进行测定,不然对结果影响较大。 当血浆中有肝素或纤维蛋白降解产物(FDP)时,会导致测值偏低。 * 1 * * 1 * Fib检测的结果评估 美国CLIA-88提出Fib指标的允许误差 为血凝四项检测中的定量检测; 有国际标准: WHO标准品98/612; 可追溯性 正常值范围:2-4g/L; 美国临床实验室改进修正案 CLIA-88允许误差范围为20%。 Fib 总允许误 (Tea) 靶值 ±15% 精密度(CV%) 批内变异 2 同一天 批间变异 3 天间变异 4 * 1 * 血凝试剂常见的问题 APTT、PT延长及缩短 TT延长 Fib含量过高及过低 * 1 * 标本的原因 抗凝剂与血液比例不对,如大于1:9; 抗凝剂配制错误,如枸橼酸钠含2个结晶水仍按3.8%配制; 抗凝剂应用枸橼酸钠溶液,不能用干燥品,或其他抗凝剂; 抗凝剂与血浆混合时摇匀过于剧烈,使凝血因子被破坏; 血细胞比容积大于55%,抗凝剂比例没变(仍按1:9); 标本陈旧,超过2小时甚至更长; 口服抗凝药或凝血因子异常; 采血不顺利,有郁滞现象; 标本运输未加盖,致使CO2升高PH升高; 血浆分离应3000rpm,10分钟; 临产妇FBG含量较高,可能会超过正常值; 质控标本2-8℃超过8小时或失效; * 1 * * 1 * 复溶用蒸馏水及材料的原因 复溶蒸馏水质量差; 未用塑料或硅化玻璃管; 实验器材污染; 仪器本身有问题,如灵敏度不够(仪器可用手工操作排除、或凝固终点不对(一般凝固终点在50%有时需根据试剂不同作相应调整到30%甚至20%。 * 1 * 试剂本身的原因 复溶后试剂反复使用。如整瓶复溶好的试剂放入预温槽预温,测试完成后,剩余放回冰箱。反复如此试剂在37℃的时间过长; 复溶后试剂使用时间过长; 试剂储存、运输温

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