磺丁基醚—β—环糊精拆分莫达非尼及其立体选择性差异研究.docVIP

磺丁基醚—β—环糊精拆分莫达非尼及其立体选择性差异研究 　　1引言 　　莫达非尼（Modafinil）是一种用于治疗发作性睡眠和轮班工作睡眠障碍的神经兴奋剂 [1]。莫达非尼结构中有一个手性硫原子（见图1），存在一对手性对映体，其手性对映体在药理药效方面具有一定差异 [2]。目前，已有R异构体阿莫达非尼上市，因此其手性拆分在药物质量控制等方面具有重要意义。莫达非尼手性拆分已有文献报道的多为手性柱拆分 [3，4]，本研究组建立了以磺丁基醚β环糊精（SBEβCD）为手性拆分试剂的毛细管电泳分离方法 [5]。但在环糊精与莫达非尼对映体的拆分作用机理方面，未见相关报道。手性对映体的拆分机理研究目前有高效液相色谱 [6]、毛细管电泳 [7，8]、手性传感器 [9，10]和分子模拟 [11-13]等方法。本研究以毛细管电泳法拆分莫达非尼对映体，探讨莫达非尼手性拆分的热力学问题；同时借助分子模拟方法计算模拟环糊精莫达非尼异构体之间相互作用，预测包合物的三维结构及其稳定性，从分子相互作用角度解释环糊精手性识别莫达非尼的机理。 　　2实验部分 　　2.1毛细管电泳分离实验 　　仪器：HP3DCE毛细管电泳仪（Agilent公司），DAD检测器，ChemStation工作站，熔融石英毛细管柱（河北永年光导纤维厂）。试剂： R莫达非尼对照品和莫达非尼消旋体对照品（中国药科大学医药化工研究所）；S莫达非尼（凯试（上海）科技有限公司）。SBEβCD（江苏巨环医药有限公司）。 　　分离条件： 毛细管（50 cm × 50 μm， 有效长度41.5 cm），操作电压20 kV，柱温15-35 ℃，检测波长225 nm，压力进样5 kPa × 5 s。缓冲液：20 mmol/L Na2HPO4（pH 7.0），SBEβCD 浓度为5-50 mmol/L。两次进样之间分别用0.1 mol/L NaOH和水各冲洗2 min，再用缓冲液冲洗3 min。 　　2.2分子模拟对接 　　莫达非尼分子对映体的构建及优化采用Chem3D Ultra1程序进行。建好分子模型后以MM2进行构象优化。βCD分子结构由βCD与酶复合物的晶体结构（从蛋白质晶体结构数据库获得）去除水分子和配体分子而获得，在此基础上构建SBEβCD的结构，而后进行能量优化，所得结果供分子对接使用。 　　莫达非尼对映体和SBEβCD的对接使用Gold V3.0.1程序进行柔性对接，使用GoldScore打分函数得到分子相互作用的拟合度（Fitness）数值。用Fitness函数值判断分子对接结果。 　　3结果与讨论 　　3.1手性对映体拆分实验 　　过程，且在低温条件下能获得较好的分离。 　　3.3结合常数计算 　　结合常数是表征分子间相互作用强弱的重要理化参数，在以环糊精为手性拆分剂的毛细管电泳手性分离中，结合常数反映环糊精分子包合对映体分子能力，也反映其对对映体的区分能力。双倒数法是进行结合常数计算 　　4结论 　　以SBEβCD为手性拆分试剂，采用毛细管电泳法对莫达非尼对映体进行拆分，并利用分子模拟对其立体选择性差异进行了研究。热力学数据显示， 手性分离过程主要是焓驱动过程，在低温条件下能获得较好的分离。采用双倒数法求取了莫达非尼对映体与SBEβCD的结合常数， R对映体的结合常数大于S对映体。利用Gold软件对莫达非尼对映体和SBEβCD进行了对接，Fitness打分函数结果表明， R对映体比S对映体与SBEβCD结合更稳定，氢键作用的差异可能是能达到手性拆分的原因。 　　References 　　1Gerrard P， Malcolm R. Dis. Treat， 2007， 3： 349-364 　　2Darwish M， Bond M， Ezzet F. J. Clin. Pharmacol.， 2012， 52（9）： 1328-1342 　　3Rao R N， Shinde D D. Biomed. Chromatogr.， 2009， 23： 811-816 　　4JI YiBing， FAN XiaoMei， ZHU Xiong. Chinese J. Pharmaceu.， 2010， 41（3）： 211-212 　　季一兵， 范晓梅， 朱 雄. 中国医药工业杂志， 2010， 41（3）： 211-212 　　5Wang W， Xiang S Y， Zhou X J， Ji Y B， Xiang B R. Molecules， 2011， 17（1）： 303-314 　　6Lmmerhofer M. J. Chromatogr. A， 2010， 1217（6）： 814-856 　　7HU ChangQin， HONG Jia